[发明专利]二次酶解制备几丁聚糖的方法

权利要求书

1.一种二次酶解制备几丁聚糖的方法，包括如下步骤：

（1）将蟹壳或虾壳干燥粉碎；

（2）第一次脱钙和脱蛋白；

（3）第二次脱钙和脱蛋白；

（4）酶解脱乙酰、水洗干燥粉碎即得。

2. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，将蟹壳或虾壳粉碎至0.5～1.0μm颗粒大小。

3. 根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述的第一次脱钙是将蟹壳或虾壳粉碎后的原料中加入4-8倍重量体积比的水制成料液，再加入10～15%柠檬酸酸，充分反应后，过滤，留取残渣。

4. 根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的第一次脱蛋白是将第一次脱钙后的残渣加入4-8倍重量体积比的水，加入8～15%氢氧化钠溶液，80-100℃，1-3h，水洗至中性，过滤，留取残渣。

5. 根据权利要求3或4所述的制备方法，其特征在于，所述的第二次脱钙和脱蛋白是将第一次脱蛋白后的残渣中加入4-8倍重量体积比的水，再加入菠萝蛋白酶，加柠檬酸调PH值至5.5～6.5，40～60℃搅拌1～2h。

6. 根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，酶解壳料所用的蛋白酶占壳料重量比为0.05～0.2%。

7. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的脱乙酰是酶解脱钙和脱蛋白后，过滤，弃滤液，留取残渣，加入含有甲壳质脱乙酰酶的发酵液脱乙酰，甲壳质与发酵液的重量体积比1～3:1～6，30～32℃,48～72h，0.2MPa，120℃，20min，干燥即得几丁聚糖。

8. 根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述的甲壳质脱乙酰酶制备方法如下：

（1）制备发酵培养基：酵母粉8g，壳聚糖15g，葡萄糖30g，磷酸二氢钾2g，无水硫酸镁1g，0.01mol/l的二氯化钴10ml，水1000ml；

（2）发酵条件：发酵培养基灭菌，接种构巢曲霉菌， 30～35℃，PH6.0～7.0，72～96h。