[发明专利]一种抗柯萨奇病毒A16型的单克隆抗体的制备及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术和免疫学领域；更具体地，本发明涉及一种抗柯萨奇病毒A16型的单克隆抗体的制备及其应用。

背景技术

柯萨奇病毒A16型(Coxsackievirus A16，CA16)属于小RNA病毒科肠道病毒属，CA16是手足口病(hand，foot and mouth disease，HFMD)的主要致病原之一，CA16感染的多数患者临床病症较轻微，大多能自愈，包括发热、口腔溃疡、手足部红色疱疹。但越来越多的证据显示CA16感染也能引起神经系统损伤等重症，甚至导致死亡。目前尚未有治疗CA16感染的抗病毒药物，疫苗也还处于研发阶段。部分原因是因为缺乏可用于CA16定性和定量分析的试剂，如CA16特异性抗体。

近期，本发明人制备了基于病毒样颗粒的CA16新型疫苗，该疫苗能在小鼠体内引起较好的中和抗体反应，所产生的抗血清在CA16病毒攻击实验中能够有效保护小鼠(Liu Q等，Vaccine2012Oct19;30(47):6642-8)。其他研究小组报道了CA16灭活病毒免疫小鼠所产生的中和性抗血清也能使小鼠在一定程度上抵抗致死剂量的病毒攻击(Mao Q等，J Virol.2012Nov;86(22):11967-76)。这些结果表明中和抗体在体内可以抵抗CA16病毒感染，提示可以通过制备中和性单克隆抗体的策略来开发针对CA16感染的预防和治疗性药物。但是，目前现有技术中并没有针对CA16的单克隆抗体，只有多克隆抗体，即抗血清。

综上，制备出特异性良好的抗CA16单克隆抗体，对于开发针对CA16感染的检测试剂盒以及治疗性单抗药物是必不可少的，将为有效预防和控制手足口病提供重要帮助。

发明内容

本发明的目的在于提供一种结合分子，其特异性结合柯萨奇病毒A16型；并且，其完全抑制细胞病变的浓度低于1ng/ml。

在本发明的第一方面，提供一种分离的结合分子，所述结合分子包含以下的氨基酸序列：SEQ ID NO:8所示的重链CDR1，SEQ ID NO:9所示的重链CDR2和SEQ ID NO:10所示的重链CDR3，SEQ ID NO:14所示的轻链CDR1，SEQ ID NO:15所示的轻链CDR2和SEQ ID NO:16所示的轻链CDR3。

在一个优选例中，所述的结合分子包含重链可变区，所述的重链可变区具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。

在另一优选例中，所述的结合分子包含轻链可变区，所述的轻链可变区具有SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列。

在另一优选例中，所述的结合分子包含重链可变区和轻链可变区，其重链可变区和轻链可变区分别具有SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列。

在另一优选例中，所述的结合分子包含重链恒定区和轻链恒定区，其重链恒定区具有SEQ ID NO:18所示的氨基酸序列；或其轻链恒定区具有SEQ ID NO:20所示的氨基酸序列。

在另一优选例中，所述的结合分子结合柯萨奇病毒16型的E颗粒和F颗粒。

在本发明的另一方面，提供编码所述的结合分子的核酸分子。

在本发明的另一方面，提供所述的结合分子在制备用于检测、治疗和/或预防柯萨奇病毒A16型感染的药物中的用途。

在另一优选例中，所述的结合分子识别的是构象表位。

在本发明的另一方面，提供一种表达载体，所述表达载体中含有编码所述的结合分子的DNA。

在本发明的另一方面，提供一种宿主细胞，所述宿主细胞中含有所述的表达载体。

在本发明的另一方面，提供一种组合物，它含有所述的单克隆抗体，以及药学上可接受的载体。

在另一优选例中，所述的组合物中，所述的单克隆抗体是有效量的。

在本发明的另一方面，提供一种检测柯萨奇病毒A16型的试剂盒，其包括所述的结合分子。

在本发明的另一方面，提供一种抑制柯萨奇病毒A16型的方法，所述的方法包括给予患者有效量的所述的结合分子。

在本发明的另一方面，提供一种检测柯萨奇病毒A16型的方法，利用所述的结合分子与待测样品进行接触，通过检测所述的结合分子与受试样品的结合情况，获得柯萨奇病毒的存在情况以及存在量。

本发明的其它方面由于本文的公开内容，对本领域的技术人员而言是显而易见的。

附图说明