[发明专利]一种球形酶制品及其制备方法

权利要求书

1.一种球形酶制品，其特征在于它是由下述原料复合而成：

按照以下体积份配比复合，0.4份的酶液、

0.1—0.25份的酶活性位点保护剂、

0.1～0.35份的表面活性剂、

10份的矿物油和

0.1～0.2份的交联剂；

其中酶液为50～100重量份的纯化酶溶解于1体积份的缓冲液中而成。

2.根据权利要求1所述的一种球形酶制品，其特征在于：所述表面活性剂为Span-20。

3.根据权利要求1或2所述的一种球形酶制品，其特征在于：所述交联剂为戊二醛-聚乙烯亚胺共聚物或戊二醛-乙二胺溶液，所述戊二醛-聚乙烯亚胺共聚物为由25%戊二醛溶液与3～5%的聚乙烯亚胺溶液按照体积比1︰1混合而成，所述戊二醛-乙二胺溶液由25%戊二醛与0.33mol/L的乙二胺溶液按照1:1—1︰3的体积比混合而成。

4.根据权利要求3所述的一种球形酶制品，其特征在于：所述酶活性位点保护剂为三丁酸甘油酯。

5.根据权利要求4所述的一种球形酶制品，其特征在于：所述的表面活性剂选自Span-20，添加量优选0.25体积份。

6.一种球形酶制备方法，其特征在于包括以下步骤：

A、粗酶的纯化：对粗制酶进行纯化，然后经真空冷冻干燥后作为待固定的纯化酶；

B、乳化液体系：该乳化液体系是由油相和水相组分，其中水相组分是体积份为0.4份的酶液和0.1—0.25份的酶活性位点保护剂，其中酶液为50～100重量份的纯化酶溶解于1体积份的缓冲液中而成；

油相组分为0.1～0.35份的表面活性剂和10份的矿物油； 

C、制备交联剂：交联剂戊二醛-聚乙烯亚胺共聚物是由25%戊二醛溶液与3～5%的聚乙烯亚胺溶液按照体积比1︰1混合反应2～5min形成；交联剂戊二醛-乙二胺是由25%戊二醛与0.33mol/L的乙二胺溶液按照1︰1—1︰3的体积比反应5min～15min形成；

D、球形酶的形成：将上述油相组分与水相组分混合，搅拌，然后添加0.1～0.2体积份的交联剂进行乳化交联，分离得到球形酶，用缓冲液冲洗后得到该酶的球形酶颗粒。

7.根据权利要求6所述的一种球形酶制备方法，其特征在于：所述步骤D球形酶的形成过程中，添加交联剂后乳化液体系在700rpm转速条件下每隔30min搅拌5min，共进行2h—4h，随后乳化液体系4000rpm转速下离心15min，分离得到球形酶。

8.根据权利要求6所述的一种球形酶制备方法，其特征在于：所述步骤D球形酶的形成过程中，添加交联剂后乳化液体系在在700rpm转速条件下持续搅拌2～4h。

9.根据权利要求6所述的球形酶制备方法，其特征在于：所述步骤D球形酶的形成过程中，分离得到的球形酶，用含有5mmol/L乙醇胺的缓冲液冲洗数次。

10.根据权利要求6所述的球形酶制备方法，其特征在于：所述步骤D球形酶的形成过程中，分离得到的球形酶，用乙醇胺的缓冲液冲洗数次，再用20mmol/L、pH8.0的Tris-HCl缓冲液冲洗以清除未反应的乙醇胺。