[发明专利]珍菊降压片的指纹图谱检测方法及其应用

权利要求书

1.一种珍菊降压片的指纹图谱检测方法，包括下列步骤：

1）供试品溶液的制备：将粉碎的供试品与体积百分比为30%以上的甲醇水溶液提取溶剂混匀后，超声30分钟以上，固液分离后获得供试品溶液；

2）供试品溶液的测定：

采用高效液相色谱法测定或获得供试品溶液的指纹图谱；其中，高效液相色谱法的色谱条件为：

色谱柱：C18色谱柱；

流动相：A相为乙睛，B相为磷酸水溶液，线性梯度洗脱，流动相中，A与B的体积比随时间逐渐增加；

检测波长：320-370nm；

柱温：25-40℃；

流速：0.8-1.2mL/min。

2.如权利要求1所述珍菊降压片的指纹图谱检测方法，其特征在于，所述步骤1）中，所述甲醇水溶液优选体积百分比为50-70%的甲醇水溶液，最优选体积百分比为50%的甲醇水溶液。

3.如权利要求1所述珍菊降压片的指纹图谱检测方法，其特征在于，所述步骤1）中，所述固液分离方法为先高速离心，而后用微孔滤膜滤过的方法。

4.如权利要求1所述珍菊降压片的指纹图谱检测方法，其特征在于，所述步骤1）中，所述超声的时间为30分钟。

5.如权利要求1所述珍菊降压片的指纹图谱检测方法，其特征在于，所述步骤2）中，所述B相为体积百分比0.025-0.1%的磷酸水溶液，B相优选体积百分比0.05%的磷酸水溶液。

6.如权利要求1所述珍菊降压片的指纹图谱检测方法，其特征在于，所述步骤2）中，所述线性梯度洗脱以A相：B相体积比为10:90-70:30梯度变化洗脱。

7.如权利要求1所述珍菊降压片的指纹图谱检测方法，其特征在于，所述步骤2）中，检测波长为334nm；柱温为30℃；流速为1.0mL/min。

8.如权利要求1-7任一权利要求所述珍菊降压片的指纹图谱检测方法的用途，其特征在于，将所述指纹图谱检测方法用于珍菊降压片的质量检测或珍菊降压片中绿原酸、木犀草苷、蒙花苷、氢氯噻嗪、芦丁等任意一种或几种成分的含量测定。

9.一种同时检测珍菊降压片中绿原酸、木犀草苷、蒙花苷、氢氯噻嗪、芦丁等任意一种或几种成分的含量的测定方法，包括下列步骤：

a.供试品溶液的制备：采用权利要求1-7任一权利要求所述珍菊降压片的指纹图谱检测方法中的步骤1）制备；

b.对照品溶液的制备：将绿原酸、木犀草苷、蒙花苷、氢氯噻嗪、芦丁等任意一种或几种成分对照品用与步骤a）相同的甲醇水溶液制成对照品溶液；

c.检测：采用高效液相色谱法在相同色谱条件下分别检测供试品溶液与对照品溶液，并按外标一点法计算供试品溶液中绿原酸、木犀草苷、蒙花苷、氢氯噻嗪、芦丁等任意一种或几种成分的含量，所述高效液相色谱法的色谱条件采用权利要求1-7任一权利要求所述珍菊降压片的指纹图谱检测方法的色谱条件。

10.一种珍菊降压片的质量检测方法，包括采用权利要求1-7任一权利要求所述珍菊降压片的指纹图谱检测方法获得供试品的指纹图谱，将得到的供试品的指纹图谱与相同指纹图谱检测条件下获得的珍菊降压片的标准指纹图谱进行特征峰的比对、指纹图谱相似度计算、强峰峰面积比及特定特征峰相对峰面积偏差计算。

11.如权利要求10所述珍菊降压片的质量检测方法，其特征在于，所述标准指纹图谱以18号峰为内参比峰，包括符合下列特征的23个共有指纹峰：

其中，峰面积百分比=（特征峰面积/总峰面积）×100%

所述总峰面积为除溶剂峰、5号峰与8号峰以外的峰面积之和。

12.如权利要求11所述珍菊降压片的质量检测方法，其特征在于，所述指纹图谱相似度计算时，剔除溶剂峰、5号峰与8号峰；所述强峰峰面积比是指待测珍菊降压片的2、3、4、9、10、11、12、13、14、16、17、18和20号峰面积之和占总峰面积的比值；特定特征峰相对峰面积是指13号峰和18号峰的相对峰面积。

13.如权利要求11所述珍菊降压片的质量检测方法，其特征在于，还包括采用权利要求9所述同时检测珍菊降压片中绿原酸、木犀草苷、蒙花苷、氢氯噻嗪、芦丁等任意一种或几种成分的含量的测定方法检测供试品中绿原酸、木犀草苷、蒙花苷、氢氯噻嗪、芦丁等任意一种或几种成分的含量。