[发明专利]一种蛹虫草的培育方法及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及蛹虫草培育技术领域，具体涉及一种蛹虫草的培育方法，以及使用该方法培育得到的蛹虫草在制备治疗肺癌的药物中的应用。

背景技术

蛹虫草（Cordyceps militaris），又名北虫草，隶属于真菌界的子囊菌亚门、麦角菌科、虫草属。它是一种药用真菌。蛹虫草中含有糖、脂肪和蛋白质，此外，还含有多种氨基酸、微量元素和维生素。蛹虫草中的多种生理活性成分具有抗肿瘤、抗菌、抗氧化、保护肝脏、增强免疫力等药理作用。而其与肿瘤相关的活性物质包括虫草素、多糖、虫草酸、甾醇类、硒、类胡萝卜素、蛋白质等。

然而，目前市面上出售的蛹虫草大多只追求虫草素的含量，导致其抗肿瘤的效果不是很明显，达不到人们的期望。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种蛹虫草的培育方法，将该方法培育出的蛹虫草应用在制备治疗肺癌的药物中，其抗肺癌效果显著。

本发明所采用的技术方案为：

一种蛹虫草的培育方法，包括以下步骤：

（1）蛹虫草培养基的配制：以纯净水将KH₂PO₄、NaH₂PO₄溶解、并充分混匀后再加入干蚕蛹粉、大米粉混合均匀，然后装入培养瓶，密封、灭菌、冷却，其中各组分的含量为：

（2）接种：在步骤（1）所得的蛹虫草培养基中接种蛹虫草菌种，所述蛹虫草菌种为Cordyceps militaris(L.)Link.、液体菌种，所述蛹虫草菌种的密度为3～5个菌球/mL，所述蛹虫草培养基与蛹虫草菌种的体积比为50:1；

（3）培养：

（a）暗培养：在温度22℃、湿度75～85%条件下避光培养3～5天，至蛹虫草菌丝长满所述蛹虫草培养基表面；

（b）第5～20天采用的光照培养：白天12小时日光灯光照，温度20～22℃、湿度80～85%，光照强度控制在100～150Lx；晚上12小时闭光，温度18～20℃、湿度75～85%；每天通风2次，早晚各一次，每次20～30分钟；

（c）第21～35天采用的光照培养：白天12小时自然光加日光灯光照，温度20～22℃、湿度75%～85%，总光照强度控制在1000～1200Lx；晚上12小时闭光，温度18～20℃、湿度75～85%；每天通风2次，早晚各一次，每次20～30分钟；

本步骤（b）、（c）中培养所用的光源均为散射光，培养过程中定时对培养瓶进行转瓶使光照均匀；

（4）收获及再培养：将经过步骤（3）培养后培养瓶中成熟的蛹虫草子实体取出，剩余部分按照步骤（3）（c）的方法继续培养至子实体成熟。

作为优选，所述步骤（1）中蛹虫草培养基的灭菌条件为121℃，1.1Mpa灭菌30～40min。

本发明以蚕蛹粉为主要原料、大米为辅料配制蛹虫草培养基，并且通过梯度实验最终确定本发明所述的培养基最优配方，然后采用特殊的培养方式：暗培养、然后不同时间段不同的光照培养方式，再加上光源采用散射光，培养过程中定时对培养瓶进行转瓶使光照均匀，即通过从整体上优化培育方案，最终确定本发明所述的蛹虫草的培育方法，严格按照该方法培育得到的蛹虫草子实体经过检测，发现每1g蛹虫草子实体中腺苷含量为15-20mg、虫草素含量为7.5-8mg、多糖含量为25-33mg，明显高于采用现有技术方法所培育得到的蛹虫草。

本发明上述方法得到的蛹虫草在制备治疗肺癌的药物中的应用，即利用本发明方法培育所得的蛹虫草进行制备治疗肺癌的药物，然后进行抗肿瘤试验，结果发现本发明方法培育所得的蛹虫草制备成的药物其抗肺癌效果显著优于目前市场上市售的蛹虫草制成的药物。以接种有lewiss肺癌的C57小鼠为实验对象，将蛹虫草磨粉后制成药物，按药物中蛹虫草给药剂量为5g/kg的标准进行给药，每日给药1次，连续10天后，检测得lewis肺癌肿瘤的抑制率为19.6%。

附图说明

图1所示的是实施例中各蛹虫草制成的药物对小鼠lewis肿瘤生长抑制作用图。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明作进一步具体描述，但不局限于此。

本方法以缫丝后的蚕蛹为主要原料，大米为辅料所培养的蛹虫草可收获两季，每瓶每次可获1g干重的蛹虫草。