[发明专利]获自埃及伊蚊的防御素及其编码基因和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种获自埃及伊蚊的防御素及其编码基因和应用。

背景技术

防御素(antimicrobial peptide)是一类大自然界广泛存在的活性小肽，也称为宿主防御肽(host defense peptide)。生物体在受到刺激时就会诱导产生防御素。防御素通常是由10-50多个氨基酸残基组成的碱性小分子多肽，含有4个或多于4个带正电荷的氨基酸(如赖氨酸或精氨酸)，N端亲水C端疏水，具有双亲的性质。防御素水溶性好，大部分防御素具有热稳定性(在100℃加热10-15min仍能保持其活性)。多数防御素的等电点大于7，表现出较强的阳离子特性，对较大的离子强度和较高或较低的pH值均具有较强的抗性，此外部分防御素具备抵抗胰蛋白酶或胃蛋白酶水解的能力。

防御素根据其来源分类，可以分成六大类：(1)昆虫防御素；(2)哺乳动物防御素；(3)两栖动物防御素；(4)鱼类、软体动物、甲壳类动物来源的防御素；(5)植物防御素；(6)细菌防御素。昆虫的免疫系统缺乏获得性免疫系统，只有天然免疫系统，防御素是其天然免疫系统的一个重要组成部分。昆虫防御素具有分子小，抗菌谱广，来源丰富，且仅作用于原核细胞及病变的真核细胞的特点，为替代抗生素提供了新的途径。

除此之外，人们还发现，某些防御素对部分病毒、真菌、原虫和癌细胞等有杀灭作用，甚至能提高免疫力、加速伤口愈合过程，而且不破坏人体的正常细胞的特性。如能很好地开发利用，有望给临床医学、临床药学、食品加工、动物和植物转基因技术等领域带来革命性的进展，有着非常广阔的开发利用前景。

发明内容

本发明的目的是提供一种获自埃及伊蚊的防御素及其编码基因和应用。

本发明提供了一种获自埃及伊蚊的防御素，将其命名为AaDEF蛋白，为如下(a)或(b)或(c)或(d)或(e)：(a)由序列表的序列1自N端第24至99位氨基酸残基组成的蛋白质；(b)由序列表的序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(c)由序列表的序列4自N端第20至98位氨基酸残基组成的蛋白质；(d)由序列表的序列4所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(e)将(a)或(b)或(c)或(d)经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有抗菌肽功能的由其衍生的蛋白质。

编码所述AaDEF蛋白的基因也属于本发明的保护范围。

编码所述AaDEF蛋白的基因可为如下(1)或(2)或(3)或(4)或(5)或(6)或(7)或(8)所述的DNA分子：(1)序列表的序列2自5’末端第70至297位核苷酸所示的DNA分子；(2)序列表的序列2所示的DNA分子；(3)序列表的序列3所示的DNA分子；(4)序列表的序列5自5’末端第58至294位核苷酸所示的DNA分子；(5)序列表的序列5所示的DNA分子；(6)序列表的序列6所示的DNA分子；(7)在严格条件下与(1)或(2)或(3)或(4)或(5)或(6)限定的DNA序列杂交且编码具有抗菌肽功能的蛋白的DNA分子；(8)与(1)或(2)或(3)或(4)或(5)或(6)或(5)或(6)限定的DNA序列至少具有90％以上同源性且编码具有抗菌肽功能的蛋白的DNA分子。上述严格条件可为在6×SSC，0.5％SDS的溶液中，在65℃下杂交，然后用2×SSC、0.1％SDS和1×SSC、0.1％SDS各洗膜一次。

含有编码所述AaDEF蛋白的基因的表达盒、重组载体、转基因细胞系或重组菌均属于本发明的保护范围。

具有所述AaDEF蛋白的融合蛋白(简称AaDEF融合蛋白)也属于本发明的保护范围。

所述AaDEF融合蛋白可为如下(f)或(g)或(h)或(i)或(j)：(f)由序列表的序列9自N端第19至127位氨基酸残基组成的蛋白质；(g)由序列表的序列9所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(h)由序列表的序列11自N端第19至130位氨基酸残基组成的蛋白质；(i)由序列表的序列11所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(j)将(f)或(g)或(h)或(i)经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有抗菌肽功能的由其衍生的蛋白质。

编码所述AaDEF融合蛋白的基因也属于本发明的保护范围。