[发明专利]一种磁性双模板蛋白质分子印迹纳米粒子及其制备方法

权利要求书

1.一种磁性双模板蛋白质分子印迹纳米粒子的制备方法，其特征在于，包括以下操作：

1）以目标蛋白质为模板分子，在反应缓冲液中，将模板分子、表面氨基功能化的超顺磁性纳米粒子和功能单体充分混合均匀，然后在20～35℃下聚合反应5～24h；

其中，模板分子与表面氨基功能化的超顺磁性纳米粒子的质量比为40～80:150～300，表面氨基功能化的超顺磁性纳米粒子与功能单体的质量比为150～300:200～500；

待反应完成后，分离出聚合反应后的固态聚合物，得到结合有模板分子的磁性分子印迹纳米粒子；

2）以0.01～0.1mol/L的碱性溶液作为洗脱液，对结合有模板分子的磁性分子印迹纳米粒子洗脱2～8h，将模板分子洗脱下来，得到磁性双模板蛋白质分子印迹纳米粒子。

2.如权利要求1所述的磁性双模板蛋白质分子印迹纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述的表面氨基功能化的超顺磁性纳米粒子通过以下方法来制备：

将己二胺、无水醋酸钠、可溶性铁盐与乙二醇置于反应釜中，搅拌均匀，在190～210℃下反应6～12h；待反应完成后，分离固体产物，洗涤后真空干燥；

其中，己二胺：无水醋酸钠：可溶性铁盐的质量比为3～6:2～5:1～2；己二胺与乙二醇的质量比为3～6:20～30。

3.如权利要求2所述的磁性双模板蛋白质分子印迹纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述的固体产物的分离为：

反应完成后，在外加磁场下将固体产物吸附，固液分离，然后用超纯水洗涤收集到的固体产物至洗出液呈中性。

4.如权利要求1所述的磁性双模板蛋白质分子印迹纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述的模板分子为两种或两种以上的蛋白质；

所述的功能单体为3-氨丙基三乙氧基硅烷（APTES）和辛基三甲基硅烷（OTMS）；本功能单体还能起到交联剂的作用；

所述的反应缓冲液为pH=7.0的Tris-HCl缓冲液，Tris-HCl缓冲液中功能单体的质量浓度为2.4～8.9%，模板分子的质量浓度为0.19～0.36%。

5.如权利要求1或4所述的磁性双模板蛋白质分子印迹纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述的模板分子为血清白蛋白和血红蛋白，以质量比计，血清白蛋白：血红蛋白=1:0.8～1.2。

6.如权利要求1所述的磁性双模板蛋白质分子印迹纳米粒子的制备方法，其特征在于，所述的固态聚合物的分离为：

反应完成后，在外加磁场下将固体产物吸附，固液分离，然后用超纯水洗涤收集到的固态聚合物至洗出液呈中性。

7.一种磁性双模板蛋白质分子印迹纳米粒子，其特征在于，是以表面氨基功能化的超顺磁性纳米粒子作为载体，以两种蛋白质作为模板分子，将模板分子固定在磁性载体表面，在3-氨丙基三乙氧基硅烷和辛基三甲基硅烷的作用下，形成聚合物，再将聚合物中的模板分子洗脱下来，得到的磁性双模板蛋白质分子印迹纳米粒子。

8.如权利要求7所述的磁性双模板蛋白质分子印迹纳米粒子，其特征在于，在聚合物进行聚合时，3-氨丙基三乙氧基硅烷和辛基三甲基硅烷的质量为0.2～0.8:0.3～1.2；模板分子与表面氨基功能化的超顺磁性纳米粒子的质量比为40～80:150～300，表面氨基功能化的超顺磁性纳米粒子与功能单体的质量比为150～300:200～500。

9.如权利要求7或8所述的磁性双模板蛋白质分子印迹纳米粒子，其特征在于，所述的模板分子为血清白蛋白和血红蛋白，表面氨基功能化的超顺磁性纳米粒子的平均粒径为60～65nm。

10.权利要求9所述的磁性双模板蛋白质分子印迹纳米粒子在高选择性地去除和富集血液中的血清白蛋白和血红蛋白中的应用。