[发明专利]一种提高聚酮类化合物发酵产量的方法

权利要求书

1.一种提高聚酮类化合物发酵产量的方法，其特征在于，其包括步骤：在添加了天然油脂的培养基中培养过表达酰基辅酶A合成酶和酰基载体蛋白的基因工程菌，从发酵产物中提取聚酮类化合物，所述的基因工程菌为将含有表达酰基辅酶A合成酶和酰基载体蛋白的重组表达载体的重组大肠杆菌接合转移游动放线菌(Actinoplanes sp.)制得的过表达酰基辅酶A合成酶和酰基载体蛋白重组表达转化体。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，其还包括所述的基因工程菌的制备步骤：将表达酰基辅酶A合成酶和酰基载体蛋白的重组表达载体转化大肠杆菌，然后将所得的重组大肠杆菌接合转移游动放线菌，所得的过表达酰基辅酶A合成酶和酰基载体蛋白的重组表达转化体即为所述的基因工程菌。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的重组表达载体通过将编码所述酰基辅酶A合成酶和酰基载体蛋白的基因连接于质粒pSET152构建而成。

4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，在所述的重组表达载体中，启动编码所述酰基辅酶A合成酶和酰基载体蛋白的基因表达的启动子为红霉素抗性基因启动子erm*E，其序列如SEQ ID NO.5所示。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的酰基辅酶A合成酶和酰基载体蛋白为来源于玫瑰孢链霉菌(Streptomyces roseosporus)的酰基辅酶A合成酶和酰基载体蛋白，其分别由来源于玫瑰孢链霉菌的DptE和DptF基因编码。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的来源于玫瑰孢链霉菌的酰基辅酶A合成酶和酰基载体蛋白的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。

7.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的来源于玫瑰孢链霉菌的DptE和DptF基因的核苷酸序列分别如SEQ ID NO 3和SEQ ID NO 4所示。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的聚酮类化合物为雷帕霉素；所述的天然油脂为豆油、玉米油和花生油中的任一种或多种。

9.一种生产雷帕霉素的基因工程菌，其为将含有表达酰基辅酶A合成酶和酰基载体蛋白的重组表达载体的重组大肠杆菌接合转移游动放线菌(Actinoplanes sp.)制得的过表达酰基辅酶A合成酶和酰基载体蛋白的重组表达转化体。