[发明专利]一种纯化多肽类PDGF受体抑制剂的方法无效
申请号: | 201310466595.5 | 申请日: | 2013-10-10 |
公开(公告)号: | CN104558125A | 公开(公告)日: | 2015-04-29 |
发明(设计)人: | 张明义;黄岚;周华 | 申请(专利权)人: | 无锡麦涛岚华生物技术有限公司 |
主分类号: | C07K14/00 | 分类号: | C07K14/00;C07K1/20;C07K1/18 |
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地址: | 214174 江苏省无锡*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 纯化 多肽 pdgf 受体 抑制剂 方法 | ||
1.一种纯化多肽类PDGF受体抑制剂的方法,包括以下步骤:
1) 多肽粗品溶液用阴离子层析介质进行吸附,以平衡液进行冲洗直至去除三氟乙酸根,洗脱并收集洗脱峰,该峰的主成分为醋酸盐多肽,其中平衡液为碱性溶液及含盐的碱性溶液,洗脱液为含有醋酸溶液;
2)步骤1)收集的洗脱峰以十八烷基硅胶为固定相,以乙腈及醋酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,其中醋酸水溶液中醋酸的含量为0.1%-2%,pH为3-5;
3) 步骤2)收集的洗脱峰经过减压蒸馏去除乙腈后冻干,获得多肽原料。
2.根据权利要求1所述方法,其特征在于:步骤2)所述的流动相缓冲液pH值为3.6-4.5。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的采用阴离子交换柱法将三氟醋酸盐转换成醋酸盐,使用醋酸溶液做为洗脱液进行洗脱,醋酸溶液浓度为0.1-1.0%(V/V)。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:所述的采用阴离子交换柱法将三氟醋酸盐转换成醋酸盐,使用醋酸溶液做为洗脱液进行洗脱,其浓度为0.3%-0.5%。
5.根据权利要求1-4任意一项所述的方法,其特征在于:所述采用阴离子交换法将三氟醋酸盐转换成醋酸盐,使用阴离子交换树脂,阴离子树脂为Cellufine MAX Q-h或者Cellufine MAX CM或者其他厂家相同或相似型号的阴离子交换树脂。
6.根据权利要求1-4任意一项所述的方法,其特征在于:等度洗脱,乙腈醋酸水溶液的浓度为23%-45%(V/V)。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:等度洗脱:使用醋酸水溶液进行洗脱。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:醋酸水溶液浓度为0.2%-0.4%(V/V)。
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