[发明专利]马立克氏病抗性鸡的快速检出方法无效
| 申请号： | 201310469433.7 | 申请日： | 2013-10-10 |
| 公开（公告）号： | CN103468824A | 公开（公告）日： | 2013-12-25 |
| 发明（设计）人： | 韦平;金元昌;韦天超;磨美兰;黄亮;崔帅 | 申请（专利权）人： | 广西大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 广西南宁公平专利事务所有限责任公司 45104 | 代理人： | 杨立华 |
| 地址： | 530004 广西壮族*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 马立克氏病 抗性 快速 检出 方法 | ||
1.一种马立克氏病抗性鸡的快速检出方法，其特征在于采用半巢式PCR对BF基因可变剪接外显子7进行两轮扩增，
第一轮扩增的引物序列为外上游引物5`-GCAGGGAAGAAGGGGAAGGG-3`和外下游引物5`-GGAAGCAGAATGAGATGTGAGAGG-3`；
第二轮扩增的引物序列为内上游引物5`-TACAACATTGCGCCCGGG-3`和内下游引物5`-GGAAGCAGAATGAGATGTGAGAGG-3`。
2.根据权利要求1所述的马立克氏病抗性鸡的快速检出方法，其特征在于所述第一轮和
第二轮扩增PCR反应体系和反应条件分别为：
第一轮扩增PCR反应体系：10×PCR Buffer5.0μL，cDNA模板5.0μL，25mM外上游引物1.0μL，25mM外下游引物1.0μL，1.5U Taq酶0.6μL，10mM dNTP Mixture1.0μL，dd H2O36.4μL，共50μL；
第一轮扩增PCR反应条件：95℃5min；随后进行35个循环，每个循环包括95℃30s，61℃30s，72℃45s；最后72℃10min；
第二轮扩增PCR反应体系：10×PCR Buffer5.0μL，DNA模板5.0μL，25mM内上游引物1.0μL，25mM内下游引物1.0μL，1.5U Taq酶0.6μL，10mM dNTP Mixture1.0μL，dd H2O36.4μL，共50μL；所述DNA模板来自第一轮PCR扩增产物；
第二轮扩增PCR反应条件：95℃5min；随后进行35个循环，每个循环包括95℃30s，52℃30s，72℃45s；最后72℃10min。
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