[发明专利]一种拟核酸碱基为识别位点的罗丹明荧光探针及其制备和在核苷酸影像上的应用

权利要求书

1.一种拟核酸碱基为识别位点的罗丹明荧光探针，其特征在于：将7-甲基-2-氨基-1,8-萘啶的2位氨基与罗丹明酰氯发生取代反应和环合反应而连接到罗丹明五元内酰胺环上，具有如下A分子结构式。 

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2.一种拟核酸碱基为识别位点的罗丹明荧光探针的制备方法，其特征在于包括以下步骤： 

（a）将2,6-二氨基吡啶溶于盛有适量浓磷酸的第一反应釜中，在氩气氛围中加热到90-95度，称取4，4-二甲氧基-2-丁酮置于恒压分液漏斗中并逐滴加入2,6-二氨基吡啶的磷酸溶液中，升温至110～115度后搅拌反应5～10小时，冷却至室温，用10～15%的氨水中和反应液中的磷酸至pH=8～9，用氯仿萃取5～6次，萃取液用饱和氯化钠溶液洗2～3次，用无水硫酸镁干燥，旋转蒸发氯仿得到黑红色固体物质，用甲苯重结晶制得淡黄色粉末状中间物质2-氨基-甲基-1,8-萘啶AMND，所述2,6-二氨基吡啶与4，4-二甲氧基-2-丁酮的摩尔比为1:1； 

（b）称取罗丹明固体溶于盛有适量无水1,2-二氯乙烷的第二反应釜中，通氩气并用磁力搅拌器搅拌，再向第二反应釜中逐滴加入三氯氧磷，然后加热至回流反应4～5小时，真空干燥除去反应液后溶于盛有适量干燥乙腈的第三反应釜中，称取适量的AMND加入干燥乙腈中溶解并加入适量三乙胺混匀后逐滴加入到第三反应釜中，加热回流5～6小时，冷至室温，真空干燥，以体积比为1:1～2的乙酸乙酯和二氯甲烷为流动相的二氧化硅层析柱纯化制得淡黄色固体，再 用体积比为1:20～25正己烷和二氯甲烷的混合溶液重结晶制得白色固体粉末状的目标产物RBS；所述罗丹明与三氯氧磷的摩尔比为1:10～20，罗丹明与ANDM的摩尔比为1:1～1.5，罗丹明与三乙胺的摩尔比为1:10～30。 

3.一种拟核酸碱基为识别位点的罗丹明荧光探针，其特征是在核苷酸影像上的应用。