[发明专利]大鼠脊髓全横断损伤模型及其建立方法

说明书

技术领域

本发明属于医疗动物的模型技术领域，尤其是一种大鼠脊髓全横断损伤模型及其建立方法。

背景技术

脊髓损伤(spinal cord injury)是指由于外界直接或间接因素导致脊髓损伤，在损害的相应节段出现各种运动、感觉和括约肌功能障碍、肌张力异常及病理反射等的相应改变, 是目前公认的世界性疑难病之一。脊髓损伤成为亟待解决的问题，呈现高发生率、高致残率、高耗费及低死亡率的特点，严重影响人们的生活质量。到目前为止, 治疗并促进脊髓损伤康复的方法主要是靠药物治疗和外科手术治疗。由于脊髓损伤疾病的病理复杂，这些方法在不同程度上缓解了脊髓损伤的病理改变, 但均未取得令人满意的临床疗效。

脊髓损伤后常为两种损伤机制，一种是原发性脊髓损伤，临床表现为急性瘫痪，为急性脊髓损伤后，脊髓发生一系列的病理变化，包括出血、水肿、轴突及神经元的坏死和脱髓鞘，以及梗塞和囊肿的形成；另一种为继发性损伤，为损伤后发生一系列损伤激活的自身破坏过程，如水肿的扩展，能量代谢的改变，儿茶酚胺和兴奋性氨基酸的释放，花生四烯酸、自由基等的产生使神经损伤程度逐渐加重。但实际两种病变过程相互重叠，难以划分明确的界限。

由于脊髓损伤的病理生理机制非常复杂，目前对该机制的认识还不够深入和透彻，为了探索关于脊髓损伤的新的、有效的治疗方式，如干细胞的移植治疗，必须进一步研究脊髓损伤所涉及的病理机制及治疗方案的修复机制，进而评估治疗方案的有效性。这就需要建立一个有效的、可靠性和重复性好的以及损伤标准一致并易于操作推广的动物模型。

Allen(1911年)采用重物坠落撞击脊髓背侧，开创脊髓损伤的标准化实验。但Allen法尚存在一些问题，如挫伤脊髓的瞬间脊髓的侧向偏移，导致脊髓损伤不对称，损伤区大小不恒定。动物的瘫痪程度和持续时间出现较大的差异，从而导致损伤程度难以保持一致。

脊髓缺血再灌注损伤模型多通过阻断腹主动脉或经腹膜后左肾动脉下腹主动脉阻断造成，这种模型存在的不足之处是同时导致了腹腔及下肢等组织的广泛性缺血损伤，这无疑影响了脊髓损伤及治疗后的行为及功能的评估。

钳夹压迫性脊髓损伤模型主要是通过动脉钳夹压等压迫力造成急性或慢性压迫损伤，例如以动脉瘤夹夹持脊髓，以夹持时间长短和夹持力轻重来制造损伤程度不同的脊髓损伤模型。这种模型的缺点是钳夹夹持的部位及夹持力大小难以保持一致，从而难以控制和评估。

综上所述，建立一种条件可靠性高和重复性好的脊髓损伤模型对于研究脊髓损伤所涉及的病理机制及治疗后的修复机制以及对行为功能学的评估有着重要的意义。

发明内容

针对以上不足，本发明的目的是提供一种大鼠脊髓全横断损伤模型及其建立方法。

一种大鼠脊髓全横断损伤模型的建立方法，包括以下步骤：

（1）注射麻醉剂，固定大鼠四肢；

（2）备皮，纵行切开背部皮肤，钝性分离背部皮下组织，暴露相应节段脊柱；

（3）行椎板切除术充分暴露脊髓，挑起脊髓，完全横行截断；

（4）逐层缝合创口、创面消毒、包扎并立刻后腿肌注青霉素；

（5）术后护理。

其中，上述术后护理包括以下步骤：

a.加强营养供给，每天更换垫料；

b. 为帮助排尿及恢复排尿反射，每天按摩耻骨联合区直至大鼠自行排尿； 

c.每天清洗大鼠腹部残尿，吹干后消毒。

一种优选的大鼠脊髓全横断损伤模型的建立方法，包括：

（1）腹腔注射水合氯醛麻醉，固定大鼠四肢于板上，水合氯醛质量百分比浓度优选为10%，剂量优选为0.3 ml/100g大鼠体重，大鼠体重优选为250-300g；

（2）将胸椎对应部位备皮，纵行切开背部皮肤，钝性分离背部皮下组织，暴露相应节段脊柱；

（3）行椎板切除术充分暴露脊髓，挑起脊髓，完全横行截断；

（4）逐层缝合创口、创面以聚维酮碘溶液擦净消毒、辅以敷料包扎伤口并立刻后腿肌注青霉素，聚维酮碘溶液优选为质量体积百分比为2.5%的聚维酮碘溶液，敷料优选为医用脱脂纱布；

（5）术后护理；

其中，术后护理步骤包括：

a.加强营养供给，每天更换垫料，垫料一般为天然木屑；

b.每天按摩耻骨联合区直至大鼠自行排尿；

c.每天用肥皂水清洗大鼠腹部残尿，吹干后用聚维酮碘溶液擦拭消毒，肥皂水质量体积百分比浓度优选为0.8-2%，聚维酮碘溶液质量体积百分比浓度优选为2.5%。