[发明专利]一种溴苯腈降解菌及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及环境微生物技术领域，具体地，涉及一种溴苯腈降解菌及其应用。

背景技术

除草剂的大量使用已经对环境造成了巨大的影响。首先化学除草剂的使用在有效防除杂草的同时，也在一定程度上降低土壤中微生物的数量及土壤中一些酶的活性，从而影响土壤质量及供肥能力，且施药量越大影响越大。其次，除草剂会对地下水造成污染，从而影响人类的健康。

溴苯腈以它的辛酸酯、钠盐，钾盐的形式在国外被广泛用作选择性芽后茎叶处理触杀型除草剂。主要由叶片吸收，通过抑制光合作用的各个过程，迅速使组织坏死。本剂主要用于小麦、大麦、黑麦、玉米、高粱、亚麻等作物田间，防除蒺、苋、麦瓶草，龙葵、苍耳、猪毛菜、麦家公、田旋花、荞麦蔓等阔叶杂草。小麦用量为每亩22.5～35g（有效成份）；高粱、玉米为每亩18.7～30g；亚麻每亩不超过18.7g。溴苯腈贮存稳定，和其他除草剂一般不发生反应，除单用外，还可以和多种除草剂混配，扩大除草谱。

生物降解是自然界中溴苯腈去除的主要途径，目前国内尚没有溴苯腈高效降解菌的研究报道，因此，从溴苯腈污染的环境中分离出高效降解溴苯腈的微生物菌株，利用微生物的作用修复环境中的溴苯腈污染具有重大的理论意义和潜在的应用前景。

发明内容

本发明的目的在于针对生产实践中的实际问题和需求，提供一种溴苯腈降解菌。

本发明的另一目的是提供该菌的应用。

本发明提供的溴苯腈降解菌株BX03是一株革兰氏染色反应阴性菌，于2013年4月9日保藏于中国微生物菌种保存管理委员会普通微生物中心（简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101），分类命名为伯克霍尔德氏菌Burkholderia sp.，保藏编号为CGMCC NO.7438。

溴苯腈降解菌BX03主要生物学特性为G‐，端生鞭毛,短杆状,无芽孢,运动性。

溴苯腈降解菌BX03在LB培养基中培养两天后的特征是：菌落呈圆形、光滑湿润,中心突起状,边缘整齐,为浅黄色。所述的LB培养基的成分是：酵母膏5.00g/L，蛋白胨10.00g/L，NaCl10.00g/L，pH7.0。

本发明提供了所述溴苯腈降解菌BX03生产的菌剂。

本发明还提供了一种所述溴苯腈降解菌BX03生产菌剂的方法，包括如下步骤：斜面种－摇瓶种－种子罐－生产罐－产品，包装剂型为液体菌剂或固体吸附菌剂。

详细实施步骤为：

1）活化培养：将溴苯腈降解菌BX03的试管种接种于LB培养基中，振荡培养至对数期；

2）种子液制备：将上述培养好的菌种按10％的接种量接种入500升种子罐，培养至对数生长期。种子罐所用的培养基配方为：葡萄糖0.8%，（NH₄）₂SO₄1%，K₂HPO₄0.2%，MgSO₄0.05%，NaCl0.01%，CaCO₃0.3%，酵母膏0.02%，pH值7.2‐7.5。

3）菌剂制备：将种子液按10％的接种量接入生产罐培养发酵，发酵完成后培养液即为菌剂。生产罐所用培养基与种子罐培养基相同。

所述步骤2）中种子罐和步骤3）中生产罐的培养过程中无菌空气的通气量均为1：0.6－1.2，搅拌速度均为180－240转/分，培养温度均为30－35℃，整个工艺流程培养时间为48－60小时。

本发明提供了一种消除溴苯腈污染的降解菌，可以用发酵工业通用发酵设备进行生产，且该菌能以溴苯腈为唯一碳源和氮源进行生长，实验室生物降解实验结果表明，对100mg/L溴苯腈的降解率达到95%。

该发明生产的降解菌剂具有生产成本低，使用方便，去除效果好的优点，适合在含有溴苯腈的废水处理中推广使用。本发明对于保护生态环境，保护人类的身体健康，降低废水处理成本具有重要的意义。

附图说明

图1为显微镜下降解菌BX03菌体结晶紫染色照片；

图2为菌株BX03菌落照片；

图3为固定化小球与游离态菌剂对溴苯腈的降解实验结果。

生物材料保藏信息