[发明专利]用于检测HCV的双重探针测定法有效
申请号: | 201310475705.4 | 申请日: | 2013-10-12 |
公开(公告)号: | CN103773894B | 公开(公告)日: | 2018-04-27 |
发明(设计)人: | F.伯格曼;D.西兹曼;H.齐泽 | 申请(专利权)人: | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844 |
代理公司: | 北京坤瑞律师事务所11494 | 代理人: | 封新琴 |
地址: | 瑞士*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 hcv 双重 探针 测定法 | ||
1.至少两种可检测核酸探针和引物制备供一种用于扩增和检测可能存在于样品中的HCV靶核酸的方法使用的试剂盒的用途,其中所述方法包括下列步骤:
a)使来自所述样品的核酸与扩增试剂接触,所述扩增试剂包含聚合酶、核苷酸单体、用于生成扩增子的引物和至少两种对所述扩增子的不同序列部分特异性的可检测探针,其中所述可检测探针至少包含SEQ ID NO 6和8或其相应的互补序列,且其中所述引物是SEQ ID NO 9、10和11;
b)在一定条件下将所述核酸与所述扩增试剂一起温育一段时间,所述条件和时间足以发生扩增反应;
c)通过检测所述可检测探针与所述扩增子的所述不同序列部分的杂交来检测所述扩增子的存在或缺乏,
其中所述扩增子的存在指示所述样品中HCV的存在。
2.权利要求1的用途,其中所述可检测探针不交叠。
3.前述权利要求中任一项的用途,其中所述引物包含超过一种正向和/或反向引物。
4.前述权利要求中任一项的用途,其中在任何步骤将对照核酸添加至样品和/或纯化的核酸。
5.前述权利要求中任一项的用途,其中所述方法进一步包括在步骤c)之后和/或期间测定HCV靶核酸的数量的步骤。
6.前述权利要求中任一项的用途,其中所述对所述扩增子的不同序列部分特异性的可检测探针是5’-核酸酶探针或HybProbe对。
7.前述权利要求中任一项的用途,其中所述对所述扩增子的不同序列部分特异性的可检测探针以彼此不超过100个碱基的距离与所述扩增子杂交。
8.前述权利要求中任一项的用途,其中所述对所述扩增子的不同序列部分特异性的可检测探针携带相同标记物或不同标记物。
9.至少两种可检测核酸探针和引物制备用于扩增和检测可能存在于样品中的HCV靶核酸的试剂盒的用途,其中所述可检测核酸探针对同一扩增子的不同序列部分是特异性的,且其中所述可检测探针至少包含SEQ ID NO 6和8或其相应的互补序列,且其中所述引物是SEQ ID NO 9、10和11。
10.一种用于扩增和检测可能存在于样品中的HCV靶核酸的试剂盒,所述试剂盒包含扩增试剂,该扩增试剂包含聚合酶、核苷酸单体、用于生成扩增子的引物和至少两种对所述扩增子的不同序列部分特异性的可检测探针,其中所述可检测探针至少包含SEQ ID NO 6和8或其相应的互补序列,且其中所述引物是SEQ ID NO 9、10和11。
11.权利要求10的试剂盒,其中所述可检测探针不交叠。
12.权利要求10至11中任一项的试剂盒,其中所述引物包含超过一种正向和/或反向引物。
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