[发明专利]一种检测蚜虫非特异性酯酶活性的方法及检测试剂盒

权利要求书

1.一种检测蚜虫非特异性酯酶活性的方法，其特征在于，将底物α-乙酸萘酯和底物β-乙酸萘酯按1:1等体积混合作为混合底物，制备吸附混合底物的滤纸；采集蚜虫田间种群，匀浆单头蚜虫后，将匀浆液滴到滤纸上显色，与标准色板对比，滤纸显色越深，个体酶活性越高。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，其具体包括以下步骤：

（1）配制底物：用丙酮配制质量浓度为1%的α-乙酸萘酯和质量浓度为1%的β-乙酸萘酯，4℃冰箱保存；

（2）将步骤（1）配制的底物按1:1等体积混合，将滤纸浸入其中，2min后，室温阴干；

（3）用pH7.0的磷酸缓冲液配制0.15%的固蓝B盐作为匀浆液，匀浆单头蚜虫，取1/20体积的匀浆液滴到步骤（2）中制备的滤纸上，室温避光放置15min；

（4）待显色完全后，统计步骤（3）中的个体显色颜色，与标准色板对比，滤纸显色越深，个体酶活性越高。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤（3）中pH7.0的磷酸缓冲液，由磷酸二氢钾和十二水合磷酸氢二钠配制，浓度为0.04M。

4.一种检测蚜虫非特异性酯酶活性的检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括：

（1）吸附有混合底物的滤纸：

将丙酮配制的质量浓度为1%的α-乙酸萘酯和质量浓度为1%的β-乙酸萘酯等体积混合，吸附于定性滤纸上，阴干，锡箔纸包裹于4℃保存；

（2）显色剂缓冲液：以0.04M、pH7.0的磷酸缓冲液配制0.15%的显色剂固蓝B。

5.利用权利要求1-3任一项所述方法，检测蚜虫种群抗性个体频率的方法，其特征在于，采集蚜虫田间种群，匀浆单头蚜虫后，将匀浆液滴到滤纸上显色，与标准色板对比，统计个体显色颜色，每一种群重复检测100头以上，计算种群抗性个体频率；所述抗性为有机磷抗性。