[发明专利]一种穿山龙总皂苷的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药提取分离领域，具体而言，涉及本发明公开了一种穿山龙总皂苷的制备方法。

背景技术

穿山龙是我国传统中药，为薯蓣科薯蓣属多年生藤本植物穿龙薯蓣的根茎，主治风湿痹证，腰腿疼痛，劳损扭伤。主要含薯蓣皂甙(dioscin)等多种甾体皂甙，近几年研究发现其具有调节机体免疫、改善心脑血管、抗变态、抗风湿、止咳祛痰等作用，其甙元为合成副肾皮质激素及口服液或注射液避孕的主要原料，其提取物市场需求较大，但是其提取物仅为穿山龙的粗提取，皂苷或苷元含量较低，质量不稳定，而且因为技术等条件限制，能耗损耗大，无合理的质量标准，无法进入国际市场。

发明人结合穿山龙主要成分的理化性质，通过大量的实验，成功研制了研制一种穿山龙提取物并摸索出其合理的制备参数。

发明内容

本发明的目的是一种穿山龙总皂苷的制备方法。

本发明目的是通过以下实现：

穿山龙药材加10倍量65％的乙醇提取3次，每次1.0小时，回收乙醇，浓缩成浓缩液(浓缩至每毫升浓缩液相当于1g药材)。

将100g D101大孔树脂置于径高比1：10-1：4的分离柱中，取60ml-120ml的浓缩液经树脂吸附后，以3-5倍柱床体积的蒸馏水，采用每小时1倍柱床体积的流速洗脱，弃去洗脱液，再以4-6倍柱床体积的65％乙醇，采用每小时2倍柱床体积的流速洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩，65℃减压干燥，粉碎即得。

附图说明

图1为采用本工艺制备的穿山龙总皂苷的高效液相色谱图谱

具体实施方式

为更好的理解本发明，下面通过具体的实施例进一步阐述本发明，但不应被理解为对本发明有任何的限制。

实施例1：穿山龙药材加10倍量65％的乙醇提取3次，每次1.0小时，回收乙醇，浓缩成浓缩液(浓缩至每毫升浓缩液相当于1g药材)。将100g D101大孔树脂置于径高比1：8的分离柱中，取80ml的浓缩液经树脂吸附后，以4倍柱床体积的蒸馏水，采用每小时1倍柱床体积的流速洗脱，弃去洗脱液，再以5倍柱床体积的65％乙醇，采用每小时2倍柱床体积的流速洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩，65℃减压干燥，粉碎即得。

样品质量评价：

(1)参照《中国药典》一部附录高效液相色谱法测定样品中薯蓣皂苷含量，检测条件如下：检测波长：203nm；流速：1ml／min；乙腈-水(55：45)为流动相。

对照品溶液的制备：取薯蓣皂苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备：取本品约0.25g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入65％乙醇250ml，称定重量，超声处理(功率120W，频率40kHz)20分钟，放冷，称定重量，用65％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

参照《中国药典》一部附录高效液相色谱法，精密量取10μl，分别注入液相色谱仪，测定峰面积，计算含量，平行测定薯蓣皂苷含量为12.2％，RSD=2.1％，说明工艺稳定可行。

(2)采用紫外法对穿山龙提取物中总皂苷进行检测，实验方法如下：

对照品溶液的制备：取薯蓣皂苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备：精密量取样品适量，加65％乙醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即得供试品溶液。

测定方法：精密吸取对照品溶液1、5ml，供试品溶液1ml，置具塞试管中，水浴挥干溶剂，分别精密加入高氯酸10ml，于60℃水浴加热15min，冰水终止反应，随行试剂做空白，于406nm处测定吸光度，采用外标两点法测定并计算穿山龙总皂苷含量，平行测定总皂苷含量为67.3％，RSD=2.5％，说明工艺稳定可行。

实施例2：穿山龙药材加10倍量65％的乙醇提取3次，每次1.0小时，回收乙醇，浓缩成浓缩液(浓缩至每毫升浓缩液相当于1g药材)。将100g D101大孔树脂置于径高比1：6的分离柱中，取100ml的浓缩液经树脂吸附后，以4倍柱床体积的蒸馏水，采用每小时1倍柱床体积的流速洗脱，弃去洗脱液，再以4倍柱床体积的65％乙醇，采用每小时1倍柱床体积的流速洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩，65℃减压干燥，粉碎即得。

样品质量评价：

(1)参照《中国药典》一部附录高效液相色谱法测定样品中薯蓣皂苷含量，检测条件如下：检测波长：203nm；流速：1ml／min；乙腈-水(55：45)为流动相。