[发明专利]一种耐高温中性蛋白酶HuPro及其基因和应用

说明书

技术领域

本发明涉及基因工程领域，具体地，本发明涉及一种耐高温中性蛋白酶HuPro及其基因和应用。

背景技术

蛋白酶是一类催化多肽或蛋白质水解的酶的统称。按水解底物的部位可分为内肽酶和外肽酶，前者水解蛋白质中间部分的肽键，后者则自蛋白质的氨基或羧基末端逐步降解氨基酸残基。

中性蛋白酶有着广泛的应用，例如：造纸，酿造，纺织，饲料等领域。但是，不同的工业应用，对蛋白酶的性质的需求是不同的，如：饲料工业需要嗜酸的蛋白酶，能源、纺织工业需要中碱性的中性蛋白酶。目前工业应用的中性蛋白酶，主要来自Trichoderma和Penicillium spp.，这些酶的最适pH在5.0左右，最适温度在50-60度之间，而中性、热稳定性好的酶则有更好的优势：耐热可以提高反应速率，降低底物的粘度，同时还可以抑制其他微生物的生长。

本发明的中性蛋白酶具有以下性质：最适pH8.0，在pH5.0～10.0范围内具有50%以上的酶活力，最适温度65℃，良好的热稳定性，在65℃处理1个小时酶活几乎没有损失，并且具有很高耐蛋白质变性剂和有机溶剂等特性。热稳定性优良并在中性和碱性范围内具有较高酶活力的特性使其在洗涤、纺织、食品工业应用上具有很大的潜力。

发明内容

本发明的目的是提供一种能高效应用的耐热中性蛋白酶。

本发明的再一目的是提供编码上述耐热中性蛋白酶的基因。

本发明的另一目的是提供包含上述基因的重组载体。

本发明的另一目的是提供包含上述基因的重组菌株。

本发明的另一目的是提供一种制备上述耐热中性蛋白酶的基因工程方法。

本发明的另一目的提供上述耐热中性蛋白酶的应用。

本发明从腐质霉(Humicola sp.L8)中分离得到一种新的耐高温中性蛋白酶HuPro。

本发明提供了一种中性蛋白酶HuPro，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

SEQ ID NO.1：

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其中，该酶包括535个氨基酸和一个终止密码子，N-端15个氨基酸为信号肽，因此，成熟的中性蛋白酶HuPro的理论分子量为56.3kDa

因此，成熟的中性蛋白酶HuPro的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示

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