[发明专利]一种改造的TRAIL基因序列、表达方法及应用有效
| 申请号： | 201310479275.3 | 申请日： | 2013-10-14 |
| 公开（公告）号： | CN103555729A | 公开（公告）日： | 2014-02-05 |
| 发明（设计）人： | 陈守春;潘凤;闫娟;徐琦;胡海洋;黄先洲 | 申请（专利权）人： | 成都华创生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C07K14/705;C12N15/10;C12N15/70;A61K38/17;A61P35/00 |
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| 地址： | 610041 四川省成都*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 改造 trail 基因 序列 表达 方法 应用 | ||
1.一种改造的TRAIL基因序列，其特征在于，改造后的野生型TRAIL编码cDNA序列见SEQ ID NO2。
2.根据权利要求1所述的改造的TRAIL基因序列，其特征在于，改造后的突变体TRAIL编码cDNA序列见SEQ ID NO3。
3.根据权利要求1所述的改造的TRAIL基因序列，其特征在于，改造后的突变体TRAIL编码氨基酸序列见SEQ ID NO4。
4.根据权利要求1至3任一所述的改造的TRAIL基因序列的改造方法，其特征在于，包括以下步骤：
设置连续或不连读的多个精氨酸序列；避免在编码一氨基酸三联密码子的后两位出现连续相同的两个碱基；提高编码前10个氨基酸基因序列碱基中GC含量的比例，使其处于40-70%范围内。
5.根据权利要求1至3任一所述的改造的TRAIL基因序列，其特征在于，将其编码cDNA克隆于表达载体pTWIN1上。
6.根据权利要求5所述的改造的TRAIL基因序列，其特征在于，所述表达载体pTWIN1中切除Intein内含肽序列。
7.根据权利要求5所述的改造的TRAIL基因序列，其特征在于，表达的诱导温度为20℃。
8.根据权利要求5所述的改造的TRAIL基因序列，其特征在于，所述表达载体采用BL21（DE3）宿主菌表达。
9.根据权利要求1至3任一所述的改造的TRAIL基因序列，其特征在于，所述改造的TRAIL基因编码氨基酸序列分离纯化采用Ni+亲和层析、阳离子交换层析或阴离子交换层析。
10.一种权利要求1至3任一所述的改造的TRAIL基因编码氨基酸序列用作抗肿瘤药物的用途。
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