[发明专利]一种反刍动物复合微生态饲料添加剂及其制备方法

权利要求书

1.一种反刍动物复合微生态饲料添加剂，其特征在于：将微生态饲料添加剂和黄腐酸按照2.5-5.0∶1复配；所述的微生态饲料添加剂为：将含腐植酸钠的固态培养基经过混合菌悬液发酵制备而成。

2.根据权利要求1所述的一种反刍动物复合微生态饲料添加剂，其特征在于：所述的混合菌悬液为：枯草芽孢杆菌种子液、酿酒酵母菌种子液、植物乳杆菌种子液按照2-5∶1.5-3.5∶0.5-2比例混合而成的；混合菌悬液在含腐植酸钠的固态培养基中的接种比例为8-10％(W/V)；所述的含腐植酸钠的固态培养基由固体物质和水组成，其比例为1∶0.8-1.1，其中固体物质组成成分包括：麸皮40-50％、豆粕25-30％、玉米皮20-30％、腐植酸钠3-6％、硫酸铵0.5-1％、磷酸氢二钾0.5-1％、硫酸镁0-0.1％和氯化锌0-0.05％。

3.根据权利要求1或2所述的一种反刍动物复合微生态饲料添加剂，其特征在于：所述的黄腐酸提取原料为内蒙古自治区武川地区的褐煤；所述的腐植酸钠提取原料为内蒙古自治区武川地区的褐煤。

4.根据权利要求2所述的一种反刍动物复合微生态饲料添加剂，其特征在于：所述的枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌和植物乳杆菌分别为枯草芽孢杆菌CGMCC1.0892(Bacillus subtilis CGMCC1.0892)、酿酒酵母菌CGMCC2.119(Saccharomyces cerevisiae CGMCC2.119)、植物乳杆菌CGMCC1.0557(Lactobacillus plantarum CGMCC1.0557)。

5.根据权利要求1或2或3或4所述的一种反刍动物复合微生态饲料添加剂的制备方法为：

(1)将枯草芽孢杆菌依次经过斜面培养、一级种子液培养、二级种子液培养，制得枯草芽孢杆菌活菌的种子液，活菌数达1.0×10⁸-9.9×10⁸cfu/g；

枯草芽孢杆菌的斜面培养基为：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基；一级种子液培养基为牛肉膏蛋白胨培养基；二级种子液培养基组成为豆粕40-55g/L，蛋白胨8-11g/L，牛肉膏25-35g/L，葡萄糖45-55g/L，MgCl₂0.3-1.1g/L，K₂HPO₄0.05-0.15g/L；枯草芽孢杆菌的斜面培养、一级种子液培养和二级种子液培养的培养温度均为32-36℃，时间均为22-26小时；

(2)将酿酒酵母菌依次经过斜面培养、一级种子液培养和二级种子液培养，制得酿酒酵母菌的种子液，活菌数达1.0×10⁸-9.9×10⁸cfu/g；

酿酒酵母的斜面培养基为：麦芽汁琼脂培养基；一级种子液培养基为麦芽汁培养基；二级种子液培养基组成为麸皮13-17g/L、葡萄糖7-12g/L、MgSO₄0.1-0.3g/L、K₂HPO₄0.3-0.6g/L、(NH₄)₂SO₄0.3-0.6g/L；酿酒酵母的斜面培养、一级种子液培养和二级种子液培养的培养温度均为32-36℃，时间均为22-26小时；

(3)将植物乳杆菌经斜面培养、一级种子液培养和二级种子液培养，制得植物乳杆菌的种子液，活菌数达1.0×10⁹-9.9×10⁹cfu/g；

植物乳杆菌的斜面培养基为MRS琼脂培养基；一级种子液培养基为MRS培养基；二级种子液培养基组成为豆粕8-12g/L、麸皮7-12g/L、葡萄糖3-7g/L、MgCl₂0.05-0.15g/L、K₂HPO₄0.5-0.9g/L、(NH₄)₂SO₄0.3-0.7g/L；植物乳杆菌的斜面培养、一级种子液培养和二级种子液培养的培养温度均为35-38℃、时间均为10-15小时；

(4)将上述(1)、(2)、(3)所得种子液按2-5∶1.5-3.5∶0.5-2比例混合，制备成混合菌悬液；

(5)将麸皮40-50％、豆粕25-30％、玉米皮20-30％、腐植酸钠3-6％、硫酸铵0.5-1％、磷酸氢二钾0.5-1％、硫酸镁0-0.1％和氯化锌0-0.05％混合(分别按质量百分数)，制备成培养基中的固体物质。

(6)将上述(5)所得固体物质与水按1∶0.8-1.1(W/V)比例混合，得到含腐植酸钠的固态培养基；

(7)将上述(4)所得混合菌悬液接种于上述(6)所得的固态培养基中，其比例为8-10％(W/V)在30-40℃条件下发酵36-48小时，得到微生态饲料添加剂；

(8)将上述(7)所得的微生态饲料添加剂与黄腐酸按照2.5-5.0∶1进行复配，即得成品。