[发明专利]一种伯胺基含量准确测定方法

权利要求书

1.一种伯胺基含量准确测定的方法，尤其涉及一种明胶、蛋白质等生物大分子中伯胺基含量准确测定的方法包括如下步骤：

1）准备伯氨基定量仪；

 2）排空体系内的空气；

 3）配制待测液；

 4）进行测定；按下述公式计算伯氨基含量：

其中，n₀为待测生物大分子样品中伯氨基含量（mol），n_N2为测得的氮气的量（mol），为待测生物大分子样品的质量浓度，m为待测生物大分子样品总质量（g），ρ为氮气的质量密度（g/mL），根据量气时的温度T及大气压P查表得到，V为测量氮气的体积（mL），M为氮气分子量（g / mol），C₀为待测生物大分子样品中伯氨基含量（mol/g）。

2.根据要求1所述的一种伯胺基含量准确测定的方法，尤其涉及一种明胶、蛋白质等生物大分子中伯胺基含量准确测定的方法，其特征是，步骤1）所述的准备伯氨基定量仪，具体操作如下：各旋塞涂抹真空硅脂，密封好各个接口，其中半球洗气瓶排液口（26）和反应器排液口（17）用止水夹夹好，以防止液体泄漏。

3.根据权利要求1所述的一种伯胺基含量准确测定的方法，尤其涉及一种明胶、蛋白质等生物大分子中伯胺基含量准确测定的方法，其特征是，步骤2）的具体操作如下：首先将洗液，从缓冲瓶（23）缓缓倒入，注满半球洗气瓶（20），并使洗液至缓冲瓶（23）体积的1/3处；调节斜孔三通旋塞（29）以洗液充满至斜孔三通旋塞（29）处，旋动斜孔三通旋塞（29），使斜孔三通旋塞（29）不与各方相通；从水准瓶（32）注入去离子水，旋动斜孔三通旋塞（29）使量气管与排液口（22）相通，抬高水准瓶（32）的位置，当量气管（31）充满去离子水后，旋动斜孔三通旋塞（29），使斜孔三通旋塞（29）不与各方相通；旋动三通旋塞（10），使半球洗气瓶（20）中的洗液充满至三通旋塞（10），然后调节三通旋塞（10）使得半球洗气瓶（20）不与反应装置（Ⅰ）、回收装置（Ⅳ）相通；该操作可以使量气、洗气装置中的空气被完全排出，此时半球洗气瓶（20）与量气管（31）中均充满液体，并与外界空气隔绝；开启循环水浴，设定测试所需温度，从加料管（3）加入冰醋酸，然后加入亚硝酸钠水溶液，关闭加料管（3），加去离子水液封，用少量去离子水将加料管（14）下部细管中气体赶入反应器（11），关闭加料管（14）；旋动三通旋塞（9），使反应器（11）和三通旋塞（10）相通；开启磁力搅拌（7），反应器（11）内反应生成NO气体，保持5分钟，排净反应器（11）内空气。

4.根据权利要求1所述的一种伯胺基含量准确测定的方法，尤其涉及一种明胶、蛋白质等生物大分子中伯胺基含量准确测定的方法，其特征是，步骤4）的具体操作如下：打开磁力搅拌（27），旋动三通旋塞（10），使反应装置（Ⅰ）与洗气装置（Ⅱ）相通；在加料管（14）中加入待测液，缓慢打开加料管（14）旋塞，使待测液缓慢流入反应器（11），并用少量去离子水冲洗加料管（14），以正辛醇液封；加料结束时闭合加料管（14）；反应器（11）从加入待测液开始计时，反应30~300分钟停止反应；打开加料管（3）旋塞，使得加料管（3）中液体进入反应器（11），将反应器（11）中气体完全赶入半球洗气瓶（20）；旋动三通旋塞（10），使反应器（11）与废液瓶（36）相通，不与半球洗气瓶（20）相通；打开反应器（11）的排液口（17）排净反应液；增大半球洗气瓶（20）下方磁力搅拌（27）的搅拌速度，搅拌一定时间后，关闭磁力搅拌（27），静置，旋动量气管（31）上部的斜孔三通旋塞（29），把半球洗气瓶（20）内气体赶入量气管（31），当洗气液流至斜孔三通旋塞（29）处时，旋动斜孔三通旋塞（29），使得斜孔三通旋塞（29）连接的各方互不相通；然后静置5~20分钟，提高水准瓶（32），使水准瓶（32）内液面凹面与量气管（31）内液面凹面相平，读取量气管（31）中气体体积V，同时记录此时气压P与量气管循环水浴温度T，用于计算待测液中伯氨基含量。