[发明专利]一种测定化妆品中甘草七种功效成分的方法

说明书

技术领域

本发明涉及同时测定甘草七种功效成分的方法，特别是一种测定化妆品中甘草七种活性成分的方法。

背景技术

近几年，天然植物甘草作为功效成分，被广泛用于各类化妆品中，起着美白、防晒、抗炎、调节皮脂、生发护发等多种功效作用。天然植物类化妆品的增长远超过普通化妆品，2008年～2010年增长58%，其中，增长最快的是含中草药成分的化妆品，国际品牌化妆品也开始介入中药领域，目前已经出现了一些添加中草药（如金银花、野菊花、人参、甘草、首乌和生姜）的化妆品。

甘草为豆科多年生草本植物，是临床上应用最广的传统中药之一，也是一种很好的化妆品添加剂。甘草主要含有三大类活性成分：黄酮类（甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草查尔酮A、光甘草定等），三萜类（主要成分甘草酸、甘草次酸，甘草酸二钾液相色谱检测的成分为甘草酸），以及多糖类。

据研究显示，甘草生物活性成分既能美白防晒，又有抗炎等功效。甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草查尔酮A具有抗炎、抗变态反应、免疫调节的功能。光甘草定能深入皮肤内部，有效抑制黑色素生成过程中多种酶的活性，具有美白功效；光甘草定对紫外光和可见光均能强烈吸收，具有防晒功效；光甘草定还具有防止皮肤粗糙、抗炎、抗菌功效。光甘草定是目前疗效好、功效全面的美白成分，被世界化妆品界誉为“美白黄金”，是目前国际上高档美白化妆品的主要功效成分。甘草酸二钾和甘草次酸在化妆品中有广泛的配伍性，可用于膏、霜、水、乳液、奶类和蜜类等所有化妆品，可用于防晒、美白、止痒、调节皮脂、生发护发等，可以起到类似于肾上腺皮脂激素的作用，而又没有任何副作用，

目前关于甘草黄酮类、三萜类、多糖类检测方法：分光光度法、毛细管电泳法、薄层扫描法、高效液相色谱法、超临界流体色谱法等。分光光度法操作简单，但样品未经分离纯化，误差大。毛细管电泳法、薄层扫描法速度快，选择高，但更适用定性分析。超临界流体色谱法在国际上发展很快，但在我国还处于探索阶段，因此，高效液相色谱法仍为甘草功效成分的主流分析方法。现有的资料和文献，关于高效液相色谱法检测甘草功效成分，仅局限于药品制剂的分析检测，多集中在甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素的检测。甘草检验标准，只有药典2010年版一部中甘草，测定甘草苷和甘草酸两个成分，而用这个方法不能同时分析测定上述甘草七种功效成分。在化妆品领域，迄今为止，对甘草功效成分的测定尚属空白，也没有相关的检测标准出台，而甘草功效成分在化妆品中应用越来越多，添加的限量，安全的范围，检验的标准，都值得我们越来越多的关注。

发明内容

本发明目的是提供一种测定化妆品中甘草七种功效成分的方法。

为实现上述目的本发明采用技术方案为：

一种测定化妆品中甘草七种功效成分的方法，

将待测化妆品样品的甲醇提取液上样进行液相色谱测定，同时定性和/或定量对待测化妆品样品中的七种功效成分中的一种或二种以上进行确定;

七种功效成分别为甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草酸二钾（甘草酸）、甘草查尔酮A、光甘草定、甘草次酸。

向0.5-2.0g待测样品中加入浓度为60%-80%（v/v）的甲醇，反复超声提取并离心，合并离心上清液，至旋转蒸发瓶中，旋转蒸发至不超过定容体积，转移至刻度管中加甲醇定容，经0.45μm滤膜过滤，滤液进行液相色谱测定。采用二极管阵列检测器，以十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂柱，在190-400nm进行检测，以乙腈-磷酸溶液为流动相，梯度洗脱，流速0.8-1.2mL/min，收集5.0-7.4min的组分即为甘草苷；收集9.1-11.7min的组分即为异甘草苷；收集11.3-14.3min的组分即为甘草素；收集15.6-17.9min的组分即为甘草酸二钾（甘草酸）；收集20.5-23.4min的组分即为甘草查尔酮A；收集21.9-25.0min的组分即为光甘草定；收集27.5-31.1min的组分即为甘草次酸；

其中，待测样品与甲醇按质量体积比为1:10-40（g/ml）；流动相采用22-80%乙腈（v/v）—78-20%的0.01-0.07%磷酸溶液（v/v）。

所述具体梯度洗脱为，35min内完成检测，0→4min：乙腈22%（v/v），0.05%磷酸78%（v/v）；4→27min：乙腈22%（v/v）→80%（v/v），0.05%磷酸78%（v/v）→20%（v/v）；27→35min乙腈80%（v/v）→22%（v/v），0.05%磷酸20%（v/v）→78%（v/v）。