[发明专利]从骨髓或脐带血回收的干细胞和祖细胞组合物；用于制备其的系统和方法

说明书

本申请为申请号为200780053147.5的分案申请，要求2007年3月28日的优先权。 

与相关申请的交叉参考

根据35U.S.C.§120，本申请是于2002年4月8日提交的共同未决的美国专利申请系列号10/118,291的部分继续申请，并且要求其优先权，所述美国专利申请的完整公开内容引入本文作为参考。根据35U.S.C.§120，本申请还是于2007年3月28日提交的共同未决的美国专利申请系列号11/664,212的部分继续申请，并且要求其优先权，所述美国专利申请是来自于2005年8月16日提交的国际申请系列号PCT/US2005/029288的35U.S.C.§371国家阶段申请，并且要求其优先权，所述国际申请指定美国并根据PCTArticle21（2）于2006年4月13日作为国际申请号WO2006/038993A2以英文公开，并且其依次要求于2004年9月30日提交的美国专利申请系列号10/957,095的优先权，所述美国专利申请于2007年5月1日作为美国专利号7,211,191授权，所述专利的所有公开内容整体引入本文作为参考。 

发明背景

1.发明领域

总的来说，本发明涉及用于从人骨髓或脐带血回收特定细胞群体的方法和装置。具体地，本发明包括用于高效回收（分离且分开）位于骨髓或脐带血中的干细胞和祖细胞，并且取出过量红细胞、嗜中性粒细胞、血小板和血浆的系统和方法，无需借助于通常用于改善干细胞回收效率的异生素添加剂。该系统包括无菌、功能上封闭的袋组（bag set）以及设计为在离心场中操作的微处理器控制的电机械和光学设备，所述设备基于其大小和密度使细胞群体分开，并且随后将这些干细胞和祖细胞以预定最终体积转移至干细胞袋。本发明还包括由人骨髓或脐带血制备的干细胞和祖细胞组合物，其可用于立即使用或 用于贮存和随后使用。 

2.相关技术描述

为了本说明书和权利要求的目的，使用下述定义： 

“自体使用”意指人细胞或组织植入、移植、输注或转移回细胞或组织从其回收的个体内。 

“类晶体”意指用于电解质替换或增加血管内体积的等渗盐和/或葡萄糖溶液，例如盐水溶液、林格氏（Ringer's）乳酸盐溶液或5％葡萄糖水溶液。 

“造血干细胞”是产生许多类型的血细胞包括红细胞（RBCs）、白血球、白细胞（WBCs）和血小板的多能干细胞。 

“白血球”或白细胞是造血谱系中的细胞，其主要包括单核细胞、淋巴细胞和嗜中性粒细胞，并且表达细胞表面抗原CD45（CD45+细胞）。 

“淋巴细胞”是如通过Sysmex XE-2100测量的淋巴样谱系细胞，其可以包括成熟淋巴细胞（T细胞、B细胞、NK细胞）以及发育中的淋巴细胞例如淋巴母细胞。 

“最低限度处理的骨髓或脐带血”意指用于干细胞和祖细胞的抗凝（例如用肝素或柠檬酸盐）骨髓或脐带血处理，其不包括添加化学物质（除水，类晶体，或灭菌、防腐或贮存试剂外），并且不改变细胞或组织的相关生物特征。 

“单核细胞”是如通过Sysmex XE-2100测量的髓样谱系细胞，其可以包括成熟单核细胞和发育中的单核细胞例如成单核细胞。 

“单核的细胞”（MNC）是造血谱系中的细胞，其包括单核细胞和淋巴细胞。 

“嗜中性粒细胞”是如通过Sysmex XE-2100测量的髓样谱系细胞，其可以包括多形核嗜中性粒细胞和发育中的嗜中性粒细胞，例如带形、晚幼粒细胞、中幼粒细胞和成粒细胞。 

“血小板”是如通过Sysmex XE-2100测量的巨核细胞系细胞，其可以包括成熟血小板（凝血细胞）。 

“祖细胞”是通过一系列细胞分裂产生不同细胞谱系的干细胞直接后代。 

“红细胞”如通过Sysmex XE-2100测量的红细胞系细胞，其包括成熟RBC而不是具核红细胞。 

“干细胞”是具有3种一般性质的多能细胞：（1）它们能够长期分裂且更新其自身；（2）它们是非特化的；和（3）它们可以产生不同的特化细胞类型。关于干细胞的细胞表面抗原标记是CD34抗原，升高的胞内酶醛脱氢酶（ALDH）浓度也是这样。