[发明专利]检测EB病毒的方法及量子点标记免疫层析试纸及其制备方法

权利要求书

1.一种量子点标记免疫层析试纸，其特征在于，设有塑料板、硝酸纤维素膜、玻璃纤维素膜A、量子点标记EB病毒IgA单克隆抗体的玻璃纤维素膜B、吸水纸；

其中，所述塑料板上从下到上依次粘贴有玻璃纤维素膜A、量子点标记EB病毒IgA单克隆抗体的玻璃纤维素膜B、硝酸纤维素膜、吸水纸；

其中，所述硝酸纤维素膜一端有EB病毒多克隆抗体和兔抗鼠二抗，以此形成检测带T和质控带C；

其中，所述量子点标记的EB病毒IgA单克隆抗体位于玻璃纤维素膜B的一端，与检测带T和质控带C相对应，并且量子点标记的EB病毒IgA单克隆抗体位于进样点一端。

2.如权利要求1所述的量子点标记免疫层析试纸，其特征在于，所述量子点为CdTe/ZnSe核壳量子点。

3.如权利要求1所述的量子点标记免疫层析试纸，其特征在于，所述塑料板为粘性PVC底板。

4.如权利要求1所述的量子点标记免疫层析试纸，其特征在于，所述EB病毒多克隆抗体的浓度为0.5g/L。

5.如权利要求1所述的量子点标记免疫层析试纸，其特征在于，所述兔抗鼠二抗的浓度为1.0g/L。

6.如权利要求1所述的量子点标记免疫层析试纸，其特征在于，所述检测带T和质控带C间距不少于5mm。

7.如上任意一项权利要求所述的量子点标记免疫层析试纸的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）量子点与EB病毒IgA单克隆抗体的偶联：

取0.01M的PBS缓冲液100～200uL与5～20uL表面连有羧基的量子点；

选取偶联试剂；

加入EB病毒IgA单克隆抗体150～200uL；

摇床反应1～4小时；

层析柱过滤，离心纯化；

用1%～5%的牛血清白蛋白封闭；

4℃保存；

（2）试纸的制备：

用0.05～0.15M的PBS缓冲液稀释EB病毒多克隆抗体及兔抗鼠二抗，将0.5g/L EB病毒多克隆抗体和1.0g/L兔抗鼠二抗喷在硝酸纤维素膜上，形成检测带T和质控带C，T带和C带间隔5mm，室温晾干，将硝酸纤维素膜放入PBS缓冲液中，37℃封闭待用，或者干燥后4℃保存；

将量子点标记的EB病毒IgA单克隆抗体均匀喷覆于玻璃纤维膜B上，室温干燥，4℃保存；

在塑料板上依次粘帖玻璃纤维素膜A、量子点标记EB病毒IgA单克隆抗体的玻璃纤维素膜B、硝酸纤维素膜、吸水纸；

用试纸切刀切割成试纸，干燥后密封保存。

8.如权利要求7所述的量子点标记免疫层析试纸的制备方法，其特征在于，步骤（1）中的偶联试剂选自羟基硫代琥珀酸亚胺、1-（3-二甲基氨丙基）-3乙基碳二胺盐酸盐。

9.用权利要求1-6任意一项所述的试纸检测EB病毒，其特征在于，包括如下步骤：将样品点样在组装好的试纸上接近EB病毒IgA单克隆抗体的一端，反应5min后，在紫外分析仪中观察结果。