[发明专利]一种KRT8基因外显子区域中SNP位点及其确定方法在审
申请号: | 201310485646.9 | 申请日: | 2013-10-16 |
公开(公告)号: | CN103602671A | 公开(公告)日: | 2014-02-26 |
发明(设计)人: | 韩英 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第四军医大学 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/68 |
代理公司: | 北京汉昊知识产权代理事务所(普通合伙) 11370 | 代理人: | 孟海娟 |
地址: | 710000 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 krt8 基因 子区 域中 snp 及其 确定 方法 | ||
1.一种KRT8基因外显子区域中SNP位点,其特征在于是KRT8基因第8外显子区域12563位G/T多态的SNP位点,具有SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2的核苷酸序列。
2.一种KRT8基因外显子区域中SNP位点的确定方法,其特征在于是通过以下的步骤实现的:
(1)提取宿主细胞的基因组模板DNA;
(2)将所述模板DNA进行PCR扩增,其引物是:
上游:5’-ACGTTGGATGTTCTTCACAACCACGGCCCT-3’,
下游:5’-ACGTTGGATGTTCTTCACAACCACGGCCCT-3’;
将扩增后的PCR产物进行纯化;
(3)纯化后的PCR产物进行PCR延伸反应,所述延伸反应的引物是:
下游:5’-GGAGGAGCTGGTGCGG-3’,
最后进行树脂纯化;
(4)芯片点样后,采用质谱仪检测,进行数据分析,确定SNP位点基因型。
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