[发明专利]一种基于DCDR光谱技术的精浆果糖快速检测的方法

权利要求书

1. 一种基于DCDR光谱技术的精浆果糖快速检测的方法，其特征是：

精浆超滤液制备

液化后的精液样品，离心机上以3000g离心力离心10分钟，移液枪吸取上层精浆溶液1～3ml，缓慢注入到离心管中，然后以7500g离心力离心10～18分钟，获得精浆超滤液保存备用；

精浆超滤液的液滴沉积处理

吸取10μl的精浆超滤液滴加于光滑、干燥的Ramchip基底中，而后放入恒温干燥箱进行加热干燥浓缩，形成液滴沉积的精浆超滤液；

拉曼光谱测量

将形成液滴沉积的精浆超滤液置于显微镜下，设置CCD曝光时间，400～1800cm^-1波数范围，采集拉曼光谱信号，重复测量三次，取其平均值；

果糖为内标的DCDR定量检测

（1）用移液枪吸取保存备用的精浆超滤液，分成A、B两等份，其中A中加入等体积量浓度为20mg/ml的果糖溶液，并吸取10μl滴加到Ramchip基底形成液滴沉积；从B中吸取10μl也滴加到Ramchip基底形成液滴沉积；分别测量液滴沉积中心位置400～1800cm^-1波数范围的拉曼光谱，记录并比较两者在627cm^-1峰位的光谱强度值，确定627cm^-1为果糖的重要特征峰。

（2）吸取10μl的精浆超滤液和粉末状标准样果糖配制成已知浓度为10mg/ml的果糖溶液分别静置于光滑、干燥的Ramchip基底，加热干燥12～16分钟，完成液滴沉积，测量并记录精浆超滤液的果糖特征峰627cm^-1的强度值，同时以10mg/ml的果糖溶液为参考，通过特征峰的强度比值计算出超滤液中果糖的浓度含量。

2. 根据权利要求1所述的一种基于DCDR光谱技术的精浆果糖快速检测的方法，其特征是所述的精浆超滤液预浓缩时，干燥温度为28～30℃，干燥12～16分钟。

3. 根据权利要求1所述的一种基于DCDR光谱技术的精浆果糖快速检测的方法，其特征是所述的拉曼光谱测量时， CCD曝光时间为22～26s。