[发明专利]酶辅助超声法提取蒙药瞿麦总皂苷的方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物成分提取领域，特别地，涉及瞿麦总皂苷的提取。

背景技术

瞿麦Dianthus superbus L，别名十样景花、竹节草花、山瞿麦、剪绒花，蒙药名：高优-巴沙嘎。石竹科多年生草本植物，全草入药，性苦、寒、辛、无毒。具有利尿通淋，破血通经。用于热淋，血淋，石淋，小便不通，淋沥涩痛，月经闭止，是蒙医常用药之一。瞿麦皂苷具有免疫作用，能抑制人体B细胞免疫球蛋白的分泌；还具有抑菌杀虫作用。瞿麦的水和乙醇提取物对大肠杆菌、副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌和变形杆菌均有抑制作用；抗脂质过氧化；兴奋子宫；溶血作用；具有心血管药理活性，表现为提高浆膜的渗透性、正性肌力、抗心律失常、舒张血管、降低血压、止痛、抗高胆固醇和保护毛细血管等作用。本实验采用酶辅助超声法提取蒙药瞿麦中总皂苷，酶能够破坏植物细胞壁，使有效成分快速溶出，而超声波产生的振动作用加强了胞内物质的释放、扩散和溶解，从而显著提高提取效率。总皂苷的测定方法有重量法,UV,TLCS,HPLC,GC-MS法。目前对蒙药瞿麦总皂苷的工艺研究和含量测定尚未见报道

发明内容

本发明提供了一种酶辅助超声法提取蒙药瞿麦中总皂苷的方法,具体包括步骤：称取瞿麦粉末，按重量体积比1：10加入石油醚于50℃水浴加热回流2h,过滤，干燥至无石油醚味，按与瞿麦粉末重量体积比1：30（料液比）加入pH为6.0的HAc-NaAc缓冲液，浸泡30min，按与瞿麦粉末重量比1:4(g:mg)加入淀粉酶，60℃水浴加热30min，然后于95℃水浴灭酶10min，取出后放置至室温，超声功率180W，超声15min，过滤，滤液用水饱和正丁醇以等体积萃取。

本发明提供了一种新的高效的瞿麦总皂苷的提取方法，同时发明人发现，淀粉酶的用量、超声功率、时间、料液比四个因素对提取效率有着重大的影响，因此创造性的确定了最佳的提取工艺，同时发明人还发现，发明也发现石油醚回流、缓冲液浸泡等工艺步骤对于提取效率也有一定的影响，也同时确定了最佳的技术参数。

附图概要说明

图1：对照品与供试品光谱叠加图

图2：标准曲线图

图3：酶用量对皂苷提取率的影响，由图3可知，当酶用量为4mg时总皂苷含量最大，故选取2，4，6mg三个较优的水平做正交试验。

图4：料液比对总皂苷提取率的影响，由图4可知，在料液比为1:30时，皂苷含量最大，故选取1:25，1:30，1:35三个较优的水平做正交试验

图5：超声时间对瞿麦提取率的影响，由图5可知，在超声时间为20min时，皂苷含量最大。故选取15，20，25min作为三个较优的水平做正交试验。

图6：超声功率对总皂苷提取率的影响，由图6可知，超声功率为160W时，皂苷含量最大，故选取140，160，180W作为三个较优的水平做正交试验。

具体实施方式

实施例1

精密称取蒙药瞿麦粉末1.0g，加10mL石油醚于50℃水浴加热回流2h,过滤，干燥至无石油醚味，将其置于锥形瓶中，加入pH为6.0的HAc-NaAc缓冲液30mL（即料液比1:30），浸泡30min，按最佳工艺条件加入4mg的淀粉酶，60℃水浴加热30min，然后于95℃水浴灭酶10min，取出后放置至室温，超声功率180W，超声15min。过滤，滤液与水饱和正丁醇以等体积萃取，萃取三次，合并滤液，挥干，用无水乙醇洗出，定容至25mL。

实施例2，工艺优选参数的确定

1仪器与试药

TU-1901型双光束紫外分光光度计[北京普析通用有限责任公司]；LX-07A多功能粉碎机[上海江信科技有限公司]；电热鼓风干燥箱[上海一恒科学仪器有限公司]；AB135-分析天平[Made inSwitzerland];BSA124S型电子天平[北京赛多利斯科学仪器有限公司]；旋转蒸发仪[上海亚荣生化仪器厂]；循环水式多用真空泵[郑州长城科工贸有限公司]；旋转蒸发仪[郑州长城科工贸有限公司]；恒温水浴锅[上海亚荣生化仪器厂]；电子恒温不锈钢水浴锅余[姚市上通温控仪表厂]；KH5200DE型高功率数控超声清洗器[昆山禾创超声仪器有限公司]；PHS-25酸度计[成都世纪方舟科技有限公司]。