[发明专利]一种复方阿胶制剂的指纹图谱检测方法

说明书

技术领域

本发明属于药物质量控制技术领域，具体地说，本发明涉及一种复方阿胶制剂的指纹图谱检测方法。

背景技术

复方阿胶浆是一种补气养血的中成药，在我国以应用多年。该制剂由下述原料药制成，阿胶5份、红参6份、熟地8份、党参12份、山楂5份，将上述各组分制成本发明药物的制备方法如下：

①按照上述用量称取原料中药材；

②上述原料中药材加适量水提取、浓缩、过滤，备用；

③阿胶加适量水溶化，加入步骤②的药液中，充分混匀，备用。

④在步骤③中加入适量的白糖，加热使溶解，混匀，既得口服液。

步骤③所得混合溶液，加入药学上可接受的辅料和/或赋形剂，采用现代工艺还可制成临床可接受的任何剂型，如片剂、丸剂、胶囊、颗粒剂等。

目前，对该制剂的检测，一般仅以Rg1、Re、Rb1、总氮为检测指标，但是它根本不能全面反应产品的质量，仅以此来控制中药复方制剂的质量不是十分合理；如果用别的指标进行控制，一是含量成分较低，二是目前没有现成的检测方法和检测条件，比较难于建立合适的检测方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种复方阿胶制剂的指纹图谱检测方法及其检测指标。

该复方阿胶制剂的指纹图谱检测方法，包括以下步骤：

（1）供试品溶液的制备：精密称取待测复方阿胶制剂，加水溶解，加0.5～3倍量乙酸乙酯、0.5～3倍量正丁醇提取，取上清液，虑过，取续滤液作为供试品溶液；

（2）对照品溶液的制备：分别精密称取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、党参炔苷、毛蕊花糖苷、绿原酸用水或甲醇或乙醇溶解，定容，作为参照物溶液；

（3）色谱条件：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂色谱柱；流动相A为0.01mol/L～1mol/L磷酸二氢钠溶液或0.01mol/L～1mol/L磷酸二氢钾溶液或0.1%～5%甲酸溶液或0.02%～5%磷酸溶液；B为乙腈或甲醇；

梯度洗脱，流速为0.5～1.5ml/min、检测波长为190～410nm，柱温25～55℃；

（4）标准指纹图谱的制定：以上述方法作为制定以红参、党参、熟地黄、山楂一种或几种成分为主的指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其他共有色谱峰的相对保留时间，其相对标准偏差不得超过±20%；

（5）以（1）～（3）所述方法检测待测复方阿胶制剂，制备待测样品的指纹图谱；

（6）将待测复方阿胶制剂的指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求的部分或全部：

Ⅰ.计算待测复方阿胶制剂的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.8～1.00；

Ⅱ.待测复方阿胶制剂指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的15%；

Ⅲ.除参照物色谱峰之外的其他共有峰与参照物色谱峰的相对保留时间与标准指纹图谱相比，相对偏差不得超过±20%。

优选的，该复方阿胶制剂的指纹图谱检测方法包括以下步骤：

（1）供试品溶液的制备：精密称取待测复方阿胶制剂，加水溶解，加四倍量配比为2:1的乙酸乙酯-正丁醇溶液提取，取上清液，用孔径为0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；

（2）对照品溶液的制备：分别精密称取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、党参炔苷、毛蕊花糖苷、绿原酸,加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为参照物溶液；

（3）色谱条件：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂色谱柱；流动相为A为0.03mol/L磷酸二氢钾溶液；B为乙腈；梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至10分钟，流动相B比例为0，从10分钟至33分钟，流动相B的比例由0至12%，从33分钟至51分钟，流动相B的比例由12%升至16%，从51分钟至68分钟，流动相B的比例由16%升至30%，从68分钟至80分钟，流动相B的比例由30%升至50%，流速为1.0ml/min、检测波长为203±1nm，柱温,35℃；

（4）标准指纹图谱的制定：精密吸取参照物溶液与供试品溶液各15μl，分别注入液相色谱仪，依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定指纹图谱，共有峰8～25个，以确定的参照物色谱峰保留时间为基准，计算其他共有色谱峰的相对保留时间，其相对标准偏差不得超过±10%；

（5）以（1）～（3）所述方法作为待测复方阿胶制剂中红参、党参、熟地黄、山楂中一种或几种成分为主的指纹图谱测试手段，制备待测样品的指纹图谱；