[发明专利]一种核酸碱基或其衍生物的自组装体系的表征方法

说明书

技术领域

本发明属于质谱分析领域，具体涉及一种自组装体系的表征方法。

背景技术

自组装过程是若干个体之间同时自发的发生关联并集合在一起形成一个紧密有序的整体，是一种整体的复杂的协同作用。小分子依靠各种分子间弱相互作用，通过“由下而上”的方式逐级组装构筑成我们丰富多彩的世界。

核酸作为遗传信息的承载者，在生物体的遗传变异以及蛋白质的合成中具有不可替代的重要作用。研究发现人体DNA末端存在着含有大量鸟嘌呤的碱基序列，它们会以Hoogsteen氢键的形式自组装形成G-四链体的结构，这种结构与在端粒形成中具有重要作用。

在碱基自组装体系的表征过程中，核磁共振技术（Nuclear Magnetic Resonance,NMR）是一种重要的表征方法。通过NMR方法可证明，2个具有手性性质的G-quartet 堆积而形成的G₈-M⁺的非对映异构体有6种；而对5’-GMP与Na⁺形成的碱基簇的研究则发现，该结构只存在两种稳定的非对映异构体，这说明碱基在自组装的过程中有着高度的立体选择性。圆二色谱法（Circular Dichroism,CD）能灵敏的反映G四链体结构中链的排列方向，从而区分平行与反平行的不同构象，而其特定吸收峰为确定四链体结构的拓扑结构提供了有用的信息。IR和UV-vis技术可以反映碱基在形成团簇离子前后是否发生了结构变化。理论计算为碱基团簇离子的结构的确定提供了重要的信息。上述方法在研究碱基簇的结构和稳定性方面都发挥了重要的作用。但上述方法在直接给出自主装分子结构信息，以及实时在线监测自组装过程中均存在一定缺陷，因而需要寻找新方法改善该自主装体系的表征。

发明内容

本发明的目的是提供一种核酸碱基或其衍生物的自组装体系的表征方法。

本发明所述的方法是使用V-EASI为电离源，对核酸碱基自组装体系进行质谱表征的。

本发明的一个目的是提供一种进样及离子化装置，所述装置由下述部分组成：

喷雾毛细管(2)；

N₂入口(3)；

样品传输管1(4)；

反应器(5)；

与所述反应器(5）配套使用的盖子(7)，所述盖子顶端设有孔1(8)；

T形三通阀(11)；

所述N₂入口(3)与所述T形三通阀(11)的纵口相连接；所述样品传输管1(4)穿过所述T形三通阀(11）的横向的两个接口；所述样品传输管1(4)的一端管口与所述喷雾毛细管（2）连接，另一端管口通过与所述反应器（5）配套使用的盖子（7）顶端上的孔1（8）插入所述反应器（5）。

所述装置还包括样品传输管2（9）和注射器（6）；所述注射器（6）的针头插入样品传输管2（9）的一端管口；所述盖子顶端还设有孔2（10）；所述样品传输管1（9）的另一端管口通过与所述反应器（5）配套使用的盖子（7）顶端上的孔2（10）插入所述反应器（5）。

所述注射器（6）为液相进样针，规格：500μL。

所述装置还包括搅拌器和磁子；将所述反应器（5）置于搅拌器上；将磁子置于所述反应器（5）内。

所述N₂入口（3）为不锈钢毛细管，所述不锈钢毛细管内径为400-700μm，外径为1200-1600μm，长度4-10cm；优选的，所述不锈钢毛细管内径为550μm，外径为1588μm，长度5.5cm；

所述喷雾毛细管（2）为不锈钢毛细管，所述不锈钢毛细管内径为500-550μm，外径为1300-1588μm，长度5.5cm；优选的，所述不锈钢毛细管内径为550μm，外径为1588μm；

所述样品传输管1（4）或样品传输管2（9）为内径50-75μm、外径300-365μm的石英毛细管；优选的，所述样品传输管1（4）或样品传输管2（9）为内径75μm、外径365μm的石英毛细管；

所述样品传输管1（4）的一端管口与所述喷雾毛细管（2）连接，具体指样品传输管1（4）的一端管口缩进所述喷雾毛细管（2）的0.2-0.5mm；优选的，样品传输管1（4）的一端管口缩进所述喷雾毛细管（2）的0.2mm；

使用医用穿刺针作为样品传输管1（4）或样品传输管2（9）的保护套管，具体指将样品传输管1（4）或样品传输管2（9）插入医用穿刺针的针筒内；