[发明专利]生防菌株BS101在防治植物灰霉病中的应用

说明书

技术领域

本发明属于作物病害防控技术领域，尤其涉及一种生防菌株BS101在防治植物灰霉病中的应用。

背景技术

苹果储存期的灰霉病是一类由灰葡萄孢（Botrytis cinerea Pers.:Fr.）引起的植物真菌病害。病菌侵染后，果面呈现圆形或近圆形水渍状病斑，不凹陷，随后扩大为浅黄色不规则形软腐病斑。由于水分的不断丧失，病斑表皮逐渐皱缩、凹陷，引起全果软腐皱缩。目前，由于我国产后水果的储存条件非常有限，而且对产后病害的防控比较薄弱，所以当储存环境中条件适宜时，灰霉病迅速蔓延，给苹果的生产造成严重经济损失。

在农业生产中，使用化学药剂是防治多种经济作物灰霉病的主要措施，常见药剂有多菌灵、扑海因、嘧霉胺等。但由于产后水果病害的防控是病害控制的最后一道防线，目前可使用的杀菌剂非常有限。此外，灰葡萄孢产孢量大，生长周期短，很容易对杀菌剂产生抗药性，已有研究发现，我国灰霉病菌已对多种杀菌剂如多菌灵、扑海因等产生严重抗药性问题。因此，对于灰霉病的防控，我们急需寻找更为有效的防治方法。此外，由于化学杀菌剂具有广谱性，其大量使用不仅容易破坏微生态环境，而且还导致非靶标抗性。

在非化学性防治措施中，生物防治为最有前途的方法之一，其具有环境友好、无农残、防效较好等优点。目前虽已有一些灰葡萄孢拮抗微生物的报道，如藤黄灰链霉素（Streptomyces luteogriseus）ECO00001(专利CN200610048662.1)、粉红粘帚菌（Bionectria ochroleuca）WY-1（专利CN200910072862.4）等，但尚未出现对芽孢杆菌的报道。另外，国内已有利用拮抗细菌生物防治由灰葡萄孢引起的番茄和百合的灰霉病（如专利CN200610048662和CN200710014340），但尚缺乏其他作物灰霉病生防菌株的研究报道。

发明内容

本发明提供了一种生防菌株BS101在防治植物灰霉病中的应用。

所述的生防菌株BS101的分类命名为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis），完整命名为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）BS101，已于2013年6月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.7727。

该生防菌株BS101在LB培养基上菌落表面粗糙、不透明，呈现皱缩、白色，能够形成芽孢，能移动，需氧型。

所述的植物具体可以为苹果。

苹果的品种可以为富士或嘎啦。

所述应用具体包括：

（1）制备含所述生防菌株BS101的生防菌剂；

（2）将所述的生防菌剂喷施在所述的植物上。

喷施生防菌剂时，喷施至植物表面水珠流动即可。

如对苹果灰霉病进行防治时，可在储藏期将所述的生防菌剂喷施在苹果上，喷施至苹果表面水珠流动即可，喷施结束后可将苹果20～25℃保湿20～24h。

为达到较好的防治效果，所述的生防菌剂中，所述生防菌株BS101的浓度优选为1×10⁸～10¹⁰CFU/mL，更优选为1×10⁸CFU/mL。

所述生防菌剂可通过如下方法进行制备：

（1）将所述生防菌株BS101于培养基中培养至OD₆₀₀为0.5～0.8，获得种子液；

（2）将种子液接种于发酵培养液中扩大培养，调节发酵液中生防菌株BS101的浓度至1×10⁸～10¹⁰CFU/mL，获得所述生防菌剂。

所述的培养基可选用LB液体培养基。

其中，所述种子液的接种量优选为1～2%（v/v），优选为1%（v/v）。