[发明专利]他克莫司联合氟康唑在制备抗真菌药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及他克莫司联合氟康唑在制备抗真菌药物中的应用。 

背景技术

随着肿瘤及艾滋病患者的不断增加，器官移植、导管插管及内窥镜技术的普遍开展，高效广谱抗生素、FK506及激素的广泛应用，人类深部真菌感染的发病率逐年增加，真菌已成为医院内感染的重要致病菌。白色念珠菌是临床真菌感染中常见的分离菌，氟康唑（fluconazole,FLC）对其有效。但随着FLC在临床的广泛应用，对其不敏感的非白色念珠菌（non-Candida albicansspecies），如光滑念珠菌（Candida glabrata，CG）、热带念珠菌、克柔念珠菌（Candida krusei，CK）、近平滑念珠菌等，分离率逐渐上升，在器官移植的病人中越来越多的非白色念珠菌被分离，甚至在某些地区非白色念珠菌的分离率高于白色念珠菌。据文献报道，非白色念珠菌对FLC耐药率已达57.5%,其中热带念珠菌、光滑念珠菌对FLC耐药性达19.4%，克柔念珠菌对FLC耐药率达100％。除此之外，非白色念珠菌对FLC、伊曲康唑等药物出现了不同程度的交叉耐药，交叉耐药性高于白色念珠菌。因此，非白色念珠菌近年来由于分离率不断升高，且对常用抗真菌药物的敏感性低，给临床抗感染治疗带来了挑战，引起了人们的关注和重视。 

非白色念珠菌在结构、致病性、耐药性等方面均与白色念珠菌不同；虽然毒力弱，但它对生物表面的粘附力却非常强，易感染免疫低下的患者，死亡率高。现有抗真菌药物品种有限，虽然已用于临床的新的唑类抗真菌药伏立康唑、棘白菌素类药物卡泊芬净和两性霉素B对非白色念珠菌有效，但它们价格昂贵，且副作用大，而开发新的抗菌谱能够覆盖非白色念珠菌的药物，耗时耗资巨大。FLC是临床最常用的抗真菌药物，具有价格便宜、副作用小、生物利用度高等优点。因此，如能从临床上应用的药物中发现能够增加FLC对非白色念珠菌敏感性的成分，联合克服非白色念珠菌对FLC的耐药性，将有重要的临床意义。 

关于FLC与其他药物联用抗真菌的研究可分为两大类：一是同为抗真菌药物之间的联用；二是FLC与非抗真菌药物之间的联用。近年来，第二种联用方式给抗真菌研究提供了新的思路，并成为大家研究的热点。这些非抗真菌药物单独应用时对真菌的作用效果很弱或无，但与FLC联用时能增强其抗真菌作用，呈现出协同作用效果。 

他克莫司（tacrolimus，FK506）在临床上广泛应用于器官移植、自身免疫性疾病的患者，而这些患者易遭受真菌感染。在临床上FK506有与FLC联合应用的机会；另外，现有研究表 明FK506与唑类药物联合，具有抗白色念珠菌的作用，特别是对耐药菌。但对于FK506和FLC联用能否逆转非白色念珠菌对FLC的耐药性，目前尚无大型定量研究报道。 

发明内容

针对上述现有技术，本发明拟以多种方法，研究FLC和FK506联用对常见非白色念珠菌的静态与动态联合抗真菌作用，研究发现，他克莫司联合氟康唑对非白色念珠菌（光滑念珠菌及克柔念珠菌）具有明显的抑制作用，能够逆转这些非白色念珠菌对FLC的耐药性，可以预见，他克莫司联合氟康唑可以用于制备抗真菌药物，这些真菌包括光滑念珠菌和克柔念珠菌。 

进一步地，对于对氟康唑呈剂量依赖性敏感的光滑念珠菌，联合应用时，他克莫司的最低抑菌浓度为0.5μg/ml，氟康唑的最低抑菌浓度为8μg/ml。对于对氟康唑耐药的光滑念珠菌，他克莫司的最低抑菌浓度为8μg/ml，氟康唑的最低抑菌浓度为16μg/ml。对于对氟康唑呈低耐药的克柔念珠菌，他克莫司的最低抑菌浓度为0.25μg/ml，氟康唑的最低抑菌浓度为8μg/ml；对于对氟康唑高耐药的克柔念珠菌，他克莫司的最低抑菌浓度为8μg/ml，氟康唑的最低抑菌浓度为16μg/ml。 

更进一步地，所述他克莫司与氟康唑的浓度以他克莫司0.5μg/ml，氟康唑8μg/ml为最佳。 

经检索，虽然已有他克莫司与氟康唑联合抗白色念珠菌的报道，但目前尚无二者联合对非白色念珠菌的抗真菌作用研究报道，所以本发明的应用具备非显而易见性。本发明将他克莫司与氟康唑联合应用，可以增强氟康唑对非白色念珠菌的抗菌活性，产生协同的抗真菌作用，并能够逆转非白色念珠菌对氟康唑的耐药性，为新药的开发及老药新用提供了研究方向。附图说明 

图1：FLC和FK506联用抗CK9作用效果（以XTT显示两药联合时于96孔平板的作用效果）。 

图2：FLC和FK506联用抗CK9作用三维效果图（X轴：FLC浓度；Y轴：FK506浓度；Z轴：各浓度组合下的ΔE值）。