[发明专利]一种血清中氨含量的测定方法

权利要求书

1.一种血清中氨含量的测定方法，其特征在于包括如下步骤：

①配制试剂a：试剂a包括缓冲液、α-酮戊二酸、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸和稳定剂；

②配制试剂b:试剂b包括缓冲液、谷氨酸脱氢酶和稳定剂；

③将试剂a、试剂b和血清样本按120～240：40:10～20比例混合反应，比色法测定血清样本中血氨含量，或在自动生化仪上检测血氨含量；

所述试剂a中各组分的浓度为：缓冲液50-250mM、α-酮戊二酸2-50mM、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸0.15-0.45mM、稳定剂占单体试剂总体积的0.05-3%；

所述试剂b中各组分的浓度为：缓冲液50-200mM、谷氨酸脱氢酶500-40000U。

2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于步骤③中所述试剂a、试剂b和血清样本按160～200：40:15～20比例混合。

3.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于步骤③中所述试剂a、试剂b和血清样本按200：40：20比例混合。

4.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于所述试剂a和试剂b中的缓冲液选自3-(环己胺)-2-羟基-1-丙磺酸缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液、吗啉代丙烷磺酸缓冲液、3-(环己胺基)丙磺酸缓冲液、3-（环己氨基）-1-丙磺酸或N-三(羟甲基)甲基-3-氨基丙烷磺酸缓冲液中的至少一种或多种的混合物。

5.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于所述试剂a中各组分的浓度为：缓冲液50-150mM、α-酮戊二酸10-30mM、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸0.15-0.25mM、稳定剂占单体试剂总体积的0.05-1%。

6.根据权利要求1-5任一权利要求所述的测定方法，其特征在于：所述缓冲液的pH为7.0-12.0。

7.根据权利要求1-5任一权利要求所述的测定方法，其特征在于：所述缓冲液的pH为为8.0-10.0。

8.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于：所述稳定剂选自牛血清白蛋白、EDTA钠/钾盐、乙二醇、叠氮钠或TritonX-100中的至少一种或多种。

9.根据权利要求1～8任一权利要求所述的测定方法，其特征在于所述试剂a的组成为：100mM3-（环己氨基）-1-丙磺酸，pH=9.5，α-酮戊二酸15mM，还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸0.20mM,EDTA钠盐0.05%，叠氮钠0.1%；

所述试剂b的组成为50mM三羟甲基氨基甲烷缓冲液，pH=8.0，谷氨酸脱氢酶20000U，BSA0.05%，叠氮钠0.1%。