[发明专利]用于检测传染性造血器官坏死病毒的LAMP引物及应用

权利要求书

1.用于检测传染性造血器官坏死病毒的环介导等温扩增引物组，为引物组A或引物组B；所述引物组A由引物1、引物2、引物3、引物4、引物5和引物6组成；所述引物组B由所述引物1、所述引物2、所述引物3和所述引物4组成；

所述引物1、所述引物2、所述引物3、所述引物4、所述引物5和所述引物6的核苷酸序列分别为序列表中的序列1、序列2、序列3、序列4、序列5和序列6。

2.根据权利要求1所述的引物组，其特征在于：所述引物组A中所述引物1、所述引物2、所述引物3、所述引物4、所述引物5和所述引物6的摩尔比为1：1：8：8：4：4；所述引物组B中所述引物1、所述引物2、所述引物3和所述引物4的摩尔比为1：1：8：8。

3.用于检测传染性造血器官坏死病毒的环介导等温扩增试剂，包括反转录酶、链置换型DNA聚合酶、Mg²⁺、dNTPs和权利要求1或2所述的引物组。

4.根据权利要求3所述的试剂，其特征在于：所述引物1、所述引物2、所述引物3、所述引物4、所述引物5、所述引物6、所述dNTPs、所述Mg²⁺、所述反转录酶和所述链置换型DNA聚合酶在所述扩增试剂中的配比为5pmol：5pmol：40pmol：40pmol：20pmol：20pmol：25mmol：5nmol：10U：8U；或

所述引物1、所述引物2、所述引物3、所述引物4、所述dNTPs、所述Mg²⁺、所述反转录酶和所述链置换型DNA聚合酶在所述扩增试剂中的配比为5pmol：5pmol：40pmol：40pmol：25mmol：5nmol：10U：8U。

5.根据权利要求3或4所述的试剂，其特征在于：所述反转录酶为AMV反转录酶。

6.根据权利要求3-5中任一所述的试剂，其特征在于：所述链置换型DNA聚合酶为Bst2.0DNA聚合酶或Bst DNA聚合酶或Bst DNA聚合酶大片段。

7.根据权利要求3-6中任一所述的试剂，其特征在于：所述试剂由所述AMV反转录酶、所述Bst2.0DNA聚合酶、所述dNTPs、10×等温扩增缓冲液和权利要求1或2所述的引物组组成；

所述10×等温扩增缓冲液的pH8.8，溶剂为水，溶质及其浓度如下：Tris-HCl20mM、KCl50mM、(NH4)₂SO₄10Mm、MgSO₄2mM、Tween-20体积分数0.1%。

8.用于检测传染性造血器官坏死病毒的环介导等温扩增试剂盒，其特征在于：所述试剂盒含有权利要求3-7中任一所述扩增试剂和荧光显色剂。

9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于：所述荧光显色剂为荧光染料SYBR Green I。

10.如下a）或b）的应用：

a）权利要求1或2所述的引物组在制备权利要求8或9所述试剂盒中的应用；

b）权利要求1或2所述引物组，或权利要求3-7中任一所述试剂，或权利要求8或9所述试剂盒在制备检测或辅助检测待测样品中是否含有传染性造血器官坏死病毒的产品中的应用。