[发明专利]蛹虫草可结实性生产种源长久保藏方法

权利要求书

1.一种蛹虫草可结实性生产种源长久保藏方法，其特征在于，包括如下的步骤：

1）将选育获得的蛹虫草可结实性优良母种种源作为初始实验种源，种源形式为斜面固体母种；

2）将液体菌种培养基分装于250毫升锥型瓶或白色滴流瓶中，每瓶装培养基100毫升，封口后装入高压灭菌锅中，在1.05Kg/cm²压强下灭菌60分钟，待冷却至25℃以下开始接种；

3）接种后的蛹虫草液体菌种在20℃±1℃温度下震荡培养，震荡频率120～130次/分钟，连续培养5～7天；选出菌球大小均匀、毛刺锐利、数量多、培养基液体清澈透明的液体菌种；

4）将步骤3）培养的液体菌种在无菌条件下分装到25毫升无菌带盖冷冻管中，每管10毫升，并进行编号，随机选出3管，其余全部同时保藏在-72℃至-86℃超级低温冰箱内；

5）将随机选出的3管液体菌种按常规方法进行试栽，试栽结果所选3管菌种都正常出草，则保藏在超级低温冰箱内的同一批次种源具有可结实性，可以作为生产性种源使用。

2.按照权利要求1所述的蛹虫草可结实性生产种源长久保藏方法，其特征在于，步骤2）中液体菌种培养基配方为：葡萄糖20克、蛋白胨5克、酵母浸粉3克、磷酸二氢钾3克、硫酸镁2克、维生素B₁10毫克、维生素B₂5毫克、水1000毫升，煮沸溶化配方中各成分物质。

3.按照权利要求1所述的蛹虫草可结实性生产种源长久保藏方法，其特征在于，超级低温冰箱内液体菌种使用前逐级解冻，具体步骤为：先把液体菌种冷冻管转到温度为-24℃至-30℃冰柜中存放24小时，然后转到温度为-10℃至-16℃冰柜中存放24小时，最后放入冰水混合0℃环境中解冻至液体培养基全部溶化。

4.按照权利要求3所述的蛹虫草可结实性生产种源长久保藏方法，其特征在于，取出液体菌种冷冻管按步骤2）和步骤3）生产液体菌种，培养好的液体菌种作为生产用液体菌种种源再扩繁一次。