[发明专利]自发性脑出血动物模型平台及其在药物筛选中的用途

权利要求书

1.一种用于制备自发性脑出血动物模型的方法，包括以下步骤：

（1）对大鼠进行训练，包括将大鼠放入步行台，让其从步行台一侧跑至另一侧，训练至大鼠能连续地通过步行台，

（2）对步骤（1）得到的大鼠进行诱发模拟自发性脑出血症状的处理；

（3）短期或长期观察和定量分析步骤（3）得到的大鼠通过步行台的步态指标；

（4）根据（3）的分析结果对所述大鼠的自发性脑出血的疾病程度和恢复状况进行判断。

2.权利要求1的方法，其中所述自发性脑出血动物模型用于自发性脑出血的长期和短期研究。

3.权利要求1的方法，其中步骤（1）为将大鼠放入步行台，让其自由从通道一侧自由跑至另一侧，训练合格的大鼠为在没有推拉的状态下通过走道，优选的，以大鼠至少可以连续三次正确地无停顿地通过通道为训练合格条件，更优选的，以大鼠至少可以连续三次正确地无停顿地在1.0-2.5秒内通过通道为训练合格条件。

4.权利要求1的方法，其中步骤（2）所述诱发模拟自发性脑出血症状的处理为将胶原酶，例如IV型胶原酶施用于大鼠一侧脑半球的纹状体。

5.权利要求1的方法，其中所述步态指标包括静态指标和/或动态指标，其中静态指标选自爪印面积、最大接触面积、接触时间、接触平均强度、最大接触平均强度或其任意组合，动态指标包括行走时间，速度变异率，步频，摇摆速度，步幅，接触率、占空比、支撑比例类型、爪间距离、步伐周期或其任意组合。

6.权利要求1的方法，其中步骤（3）中为短期观察和定量分析，在对步骤（2）进行模拟自发性脑出血症状的处理后1天到30天内（例如在第1-3天，优选在第3天），观察和分析的步态指标为爪印面积、最大接触面积、前爪接触时间、压力、摇摆速度、后爪占空比、步幅、前爪间距、支撑比例类型例如三爪支撑模式、步频和平均速度中的一种或多种的组合。

7.权利要求6的方法，其中步骤（3）中当出现：

（a）前肢和/或后肢爪印面积变小；

（b）前爪接触时间上升；

（c）压力变小；

（d）后爪摇摆速度下降；

（e）后爪占空比下降；

（f）步幅下降；

（g）前爪间距下降；

（h）三爪支撑模式比例上升；

（i）步频下降；或

（j）（a）-（i）中的任意两种或多种的组合时，

判断为大鼠的对侧脑部受损。

8.权利要求1的方法，其中步骤（3）中为长期观察和定量分析，在对步骤（2）进行模拟自发性脑出血症状的处理后1天到60天内（例如在第1-56天内，优选在第1,3，28,35和56天），观察和分析的步态指标包括爪印面积、最大接触面积、前爪接触时间、压力、摇摆速度、后爪占空比、步幅、前爪间距、支撑比例类型例如三爪支撑模式、步频和平均速度中的一种或多种的组合，优选为爪印面积、站立期持续时间和压力方面的一种或多种的组合。

9.权利要求8的方法，其中步骤（3）中当出现：

（a）前肢和/或后肢爪印面积变小；

（b）前爪接触时间与另一侧前爪接触时间的比值上升；

（c）后爪接触时间与另一侧后爪接触时间的比值下降；

（d）压力下降；

（e）步幅下降；

（f）前爪间距下降；

（g）三爪和四爪支撑模式出现的比例增多，双爪和单爪支撑模式出现的比例减少；或

（h）（a）-（g）中的任意两种或多种的组合时，

判断为大鼠的对侧脑部受损。

10.权利要求1-9中任一项的方法，其中步骤（3）通过动物步态分析系统平台来观察和分析大鼠通过步行台的所述特征指标，所述平台包括具有通道和玻璃地板的步行台、玻璃光源、摄像头、图像采集卡和分析装置，大鼠沿通道走过步行台时，爪子接触被玻璃光源照亮的玻璃地板，留下的爪印被步行台下方的摄像头拍摄到后送入图像采集卡，通过分析装置分析这些爪印可以得到步序，步态，时长，每个爪子的步长，每对前爪和后爪之间的距离，爪印的长度宽度，爪子的压力参数，并由此统计或计算出所述步态指标。

11.一种用于在待测物中筛选自发性脑出血相关药物的方法，包括利用权利要求1-10中任一项的制备自发性脑出血动物模型的方法来制备自发性脑出血动物模型，并包括将待测物给予所述方法中步骤（2）得到的大鼠的步骤，以及根据所述方法中步骤（4）的判断来对待测物是否可作为自发性脑出血相关药物进行初步判断。