[发明专利]AG22多肽的完全抗原及其制备方法和抗体无效
申请号: | 201310514525.2 | 申请日: | 2013-10-25 |
公开(公告)号: | CN103524629A | 公开(公告)日: | 2014-01-22 |
发明(设计)人: | 任培根;郭成志;李健;郭小勇 | 申请(专利权)人: | 中国科学院深圳先进技术研究院 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C07K1/107;C07K16/18 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 吴平 |
地址: | 518055 广东省深圳*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | ag22 多肽 完全 抗原 及其 制备 方法 抗体 | ||
1.一种AG22多肽的完全抗原,其特征在于,所述AG22多肽的完全抗原由AG22多肽和交联剂活化的匙孔血蓝蛋白偶联形成;
其中,所述AG22多肽的序列为SEQ ID No.1所示的序列,所述AG22多肽通过半胱氨酸与所述交联剂活化的匙孔血蓝蛋白偶联。
2.根据权利要求1所述的AG22多肽的完全抗原,其特征在于,所述AG22多肽与所述交联剂活化的匙孔血蓝蛋白的摩尔比为800~1000:1。
3.根据权利要求1所述的AG22多肽的完全抗原,其特征在于,所述交联剂为马来酰亚胺。
4.一种AG22多肽的完全抗原的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
提供交联剂活化的匙孔血蓝蛋白,并用磷酸钠缓冲液对所述交联剂活化的匙孔血蓝蛋白进行重构,得到重构后的交联剂活化的匙孔血蓝蛋白溶液;
提供AG22多肽,并将所述AG22多肽用偶联缓冲液或双蒸水溶解,得到AG22多肽溶液;
将所述重构后的交联剂活化的匙孔血蓝蛋白溶液和所述AG22多肽溶液混匀后充分反应,分离纯化后得到由所述AG22多肽和所述交联剂活化的匙孔血蓝蛋白偶联形成AG22多肽的完全抗原,其中,所述AG22多肽的序列为SEQ ID No.1所示的序列,所述AG22多肽通过半胱氨酸与所述交联剂活化的匙孔血蓝蛋白偶联。
5.根据权利要求4所述的AG22多肽的完全抗原的制备方法,其特征在于,所述交联剂活化的匙孔血蓝蛋白溶液的浓度为5mg/mL;
所述AG22多肽溶液的浓度为8mg/mL。
6.根据权利要求4所述的AG22多肽的完全抗原的制备方法,其特征在于,将所述重构后的交联剂活化的匙孔血蓝蛋白溶液和所述AG22多肽溶液混匀的操作中,所述AG22多肽与所述交联剂活化的匙孔血蓝蛋白的摩尔比为800~1000:1。
7.根据权利要求4所述的AG22多肽的完全抗原的制备方法,其特征在于,所述交联剂为马来酰亚胺。
8.根据权利要求4所述的AG22多肽的完全抗原的制备方法,其特征在于,分离纯化后得到由所述AG22多肽和所述交联剂活化的匙孔血蓝蛋白偶联形成AG22多肽的完全抗原的操作为:
用30mL含有质量百分数为0.01%的叠氮钠PBS缓冲液平衡Sephadex G-25M凝胶柱,接着向所述Sephadex G-25M凝胶柱加入反应液,用总体积10mL的所述PBS缓冲液洗涤,收集洗出液,每次收集0.5mL~1.0mL,在280nm下测量吸光度值,根据吸光度值收集含蛋白洗脱液。
9.一种AG22多肽的完全抗原的抗体,其特征在于,所述AG22多肽的完全抗原的抗体与如权利要求1~3中任一项所述的AG22多肽的完全抗原特异性结合。
10.一种AG22多肽的完全抗原的抗体,其特征在于,所述AG22多肽的完全抗原的抗体为如权利要求1~3中任一项所述的AG22多肽的完全抗原作为抗原被免疫系统识别后表达得到的抗体,所述AG22多肽的完全抗原的抗体为多克隆抗体或单克隆抗体。
11.根据权利要求10所述的AG22多肽的完全抗原的抗体,其特征在于,所述AG22多肽的完全抗原的抗体为兔源的多克隆抗体。
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