[发明专利]可表达EGFP的重组J亚群禽白血病病毒感染性cDNA克隆、及其构建方法和应用

权利要求书

1.可表达EGFP的重组J亚群禽白血病病毒感染性cDNA克隆，其特征在于所述cDNA克隆具有SED ID NO.1所示的核苷酸序列。

2.一种表达载体，其特征在于含有权利要求1所述的可表达EGFP的重组J亚群禽白血病病毒感染性cDNA克隆。

3.如权利要求2所述的表达载体，其特征在于所述的表达载体是通过将SED ID NO.1所示的核苷酸序列克隆入pBluescript II KS(+)载体中构建得到的。

4.一种J亚群禽白血病病毒反向遗传操作系统，其特征在于含有权利要求2或3所述的表达载体。

5.权利要求1所述的可表达EGFP的重组J亚群禽白血病病毒感染性cDNA克隆在拯救J亚群禽白血病病毒中的应用。

6.权利要求2或3所述的表达载体在拯救J亚群禽白血病病毒中的应用。

7.一种拯救可表达EGFP的重组J亚群禽白血病病毒的方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）构建含有可表达EGFP的重组J亚群禽白血病病毒感染性cDNA克隆的表达载体，其中所述cDNA克隆具有SED ID NO.1所示的核苷酸序列；

（2）纯化步骤（1）制备得到的表达载体，转染单层DF1细胞，转染后6h弃细胞上清，加入2ml含10%PAA胎牛血清的DMEM，在37℃温箱中继续培养，转染后72h收获病毒，反复冻融3次后连续在DF1上传代，获得拯救后的J亚群禽白血病病毒。

8.如权利要求6所述的方法，其特征在于所述的表达载体是通过将SED ID NO.1所示的核苷酸序列克隆入pBluescript II KS(+)载体中构建得到的。

9.按照权利要求7或8所述的方法制备得到的可表达EGFP的重组J亚群禽白血病病毒。

10.权利要求9所述的可表达EGFP的重组J亚群禽白血病病毒在制备检测J亚群禽白血病病毒中和抗体中的应用。