[发明专利]一种厚壳贻贝多糖部分酸水解化合物及其制备方法与应用

说明书

本发明涉及医药技术领域，本发明提供了一种新的制备我国东海厚壳贻贝多糖类部分酸水解化合物。本发明还提供了该厚壳贻贝多糖部分酸水解化合物的制备方法，以及在制备抗肿瘤药物中的应用。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体地说，本发明涉及一种新的厚壳贻贝多糖部分酸水解化合物，同时，还涉及该部分酸水解多糖类化合物的制备方法以及在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

贻贝是海产双壳贝类，俗称青口、海红，其干制品统称淡菜，除含有丰富的氨基酸、糖类、蛋白质及维生素外，还含有丰富的微量元素－硒。贝类提取物具有抗肿瘤，增加机体免疫功能，降血脂，抗衰老及抗病毒和抗菌功能；新近报道贻贝具有较高的修复DNA损伤的作用，故有望研制出抗肿瘤药物新成分；贻贝足腺细胞分泌的粘液蛋白含有的贻贝粘着蛋白（属糖蛋白类）为超强度粘液的研发等。贻贝不仅有很高的营养价值，还具有很好的药用和食疗功效，又是补肾良药，药效明显。我国沿海所产的食用贻贝主要有紫贻贝、厚壳贻贝和翡翠贻贝等。目前国内外研究对贻贝蛋白质如过氧化物歧化酶、凝集素等的分离提纯及功能进行了一定研究，但对于贻贝多糖的研究不多。

从东海厚壳贻贝中分离纯化而来的贻贝多糖具有有明显的增强机体免疫力作用及体内抗肿瘤等作用。对肿瘤细胞HO-8910、MCF-7、K562及SMMC-7721均有显著抑制增殖作用。徐红丽等采用热水提取我国东海厚壳贻贝粗多糖，DEAE-Sepharose、Sepharose CL-6B柱层析进一步分离纯化得到贻贝多糖纯品MP-I。用MTT法进行体外抗肿瘤活性的研究。结果表明贻贝多糖纯品MP-I主要由葡萄糖组成，对体外多种肿瘤细胞均有不同程度抑制作用（参见文献：徐红丽，郭婷婷，郭一峰，张建鹏，冯伟华，焦炳华。贻贝水溶性多糖MP-I的分离纯化及体外抗肿瘤活性研究[J].第二军医大学学报，2006,27（9）：998-1001.）。

由于贻贝多糖精制品是高分子聚合物，在研究其抗肿瘤作用机理时，由于其本身分子量较大，可能会对肿瘤细胞生长的内外环境造成一定影响，增加研究结果的不确定性。因此，我们通过对贻贝多糖进行不完全酸水解，模拟体内消化吸收过程，从而更加真实地反映贻贝多糖体内代谢情况并深入阐释其抗肿瘤作用机制。

发明内容

本发明的目的在于针对多糖化合物由于其高分子性质，在体内消化吸收过程复杂，从而影响其生物学功能发挥的缺点，提供一种新的厚壳贻贝部分酸水解多糖类化合物及其制备方法；本发明的第二目的是提供该部分酸水解多糖类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明的目的通过下述技术方案予以实现。

本发明的第一方面，本发明提供了厚壳贻贝多糖类化合物及其制备方法，该方法主要包括：

部分酸水解贻贝多糖的制备：在单因素实验的基础上，针对酸浓度、水解时间、水解温度等因素采用正交法确定部分酸水解条件。

除非另有说明，本发明中所采用的百分数均为质量百分数。

本发明提供了一种厚壳贻贝多糖部分酸水解化合物的制备方法，该方法包括以下步骤：

A.粗制品制备

新鲜贻贝软体组织匀浆，1%甲醇间歇搅拌浸泡24h去脂，离心取沉淀。加水煮沸5h，抽滤，残渣重复加水煮沸3h，抽滤，合并滤液。旋转蒸发50℃减压浓缩滤液。0.5%活性炭脱色，离心去沉淀；加乙醇至终浓度75%，4℃静置醇沉过夜。离心收集沉淀，分别用无水乙醇和丙酮洗涤2次，干燥得多糖水提物。多糖水提物溶于水，Sevage法除蛋白，混合液磁力搅拌，分液漏斗静置分层，弃下层有机溶剂相；反复8次，至界面无白色沉淀。旋转蒸发50℃减压浓缩上层水相，加三倍体积无水乙醇沉淀过夜，弃上清，冷冻干燥得粗多糖；

B.精制品制备