[发明专利]一种固定化氰基水解酶的制备方法及应用有效
申请号: | 201310520360.X | 申请日: | 2013-10-30 |
公开(公告)号: | CN103555708A | 公开(公告)日: | 2014-02-05 |
发明(设计)人: | 刘艳春;白刚;张文启;钱红飞 | 申请(专利权)人: | 绍兴文理学院 |
主分类号: | C12N11/14 | 分类号: | C12N11/14;C12N11/08;D06M16/00;C02F3/34;D06M101/28 |
代理公司: | 杭州裕阳专利事务所(普通合伙) 33221 | 代理人: | 应圣义 |
地址: | 312000 *** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 固定 化氰基 水解 制备 方法 应用 | ||
1.一种固定化氰基水解酶的制备方法,其特征在于,方法如下:
步骤a:PVP-Fe3O4磁性纳米粒子的制备:室温条件下,将聚乙烯基吡咯烷酮溶液、FeCl3·6H2O溶液、FeCl2·4H2O溶液混合后进行搅拌,缓慢滴加NaOH溶液,反应时间30min,反应结束后反应体系为黑色悬浮液,静置,去除上清液,用蒸馏水反复洗涤至上清液无色,烘干,得PVP-Fe3O4磁性纳米粒子粉末;
步骤b:将制得的PVP-Fe3O4磁性纳米粒子粉末加入磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液中,加入氰基水解酶,室温下混合,通过静电引力来吸附固定化氰基水解酶,充分吸附固定完成后,离心机进行离心10min后,倒出离心液,用水冲洗附于离心管壁上的物质,再离心,反复3-6次后,取最终附于离心管壁上的物质即为固定化氰基水解酶。
2.根据权利要求1所述的固定化氰基水解酶的制备方法,其特征在于:所述的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液pH=6。
3.根据权利要求1所述的固定化氰基水解酶的制备方法,其特征在于:所述的离心机离心速率为8000r/min。
4.根据权利要求1所述的固定化氰基水解酶的制备方法,其特征在于:所述的PVP-Fe3O4纳米粒子粉末与氰基水解酶重量比为50:1。
5.根据权利要求1-4任一所述的固定化氰基水解酶的应用,其特征在于:利用固定化氰基水解酶对腈纶无纺布进行亲水性改性处理。
6.根据权利要求5所述的固定化氰基水解酶的应用,其特征在于:所述的固定化酶氰基水解酶对腈纶无纺布膜进行亲水性改性处理条件为:温度40℃,pH=7.0,固定化氰基水解酶的用量3-5%owf,酶活50000U/g,浴比1:20,时间5小时。
7.根据权利要求5所述的利用固定化氰基水解酶进行改性处理后得到的腈纶无纺布的应用,其特征在于:该腈纶无纺布用于膜生物反应器中处理印染废水。
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