[发明专利]一种提高红霉素发酵单位的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物发酵技术领域，特别是涉及一种提高红霉素发酵单位的方法。

背景技术

红霉素是红霉素链霉菌的产生一类胞外产物属于大环内酯类抗生素，显碱性，对革兰氏阳性菌具有抗菌性。红霉素主要是通过红霉素链霉菌生物发酵产生。红霉素发酵是采用红色链霉菌作为产生菌，经过复壮、分离、孢子培养制备成斜面孢子备用，然后将斜面孢子接入种子罐进行种子扩大培养，最后接入发酵复合培养基，通过对培养温度、PH、基质浓度，补料等参数的控制，使其最大限度的产生红霉素的过程。目前，国内的红霉素平均发酵单位7000～8000u/ml。国外的红霉素平均发酵单位主要在12000u/ml左右。目前国内红霉素发酵至中后期时，红霉菌丝体活力依然旺盛，但产素能力就会有明显下降，影响放罐时的发酵单位。

发明内容

本发明的目的就在于克服现有技术的缺陷，在红霉素发酵过程的中后期，按比例流加一定量的硫氰酸盐（主要是硫氰酸铵、硫氰酸钠）。硫氰酸盐可与发酵液中游离的红霉素产物结合产生硫氰酸红霉素，降低了红霉素合成反应中产物浓度（发酵液中游离红霉素浓度）诱导了红霉素合成反应的正向反应，从而提高了红霉素的合成速率。而硫氰酸盐与红霉素反应产生的少量的副产物并不对红霉素的发酵过程产生明显的负面影响，硫氰酸铵产生副产物氨水甚至可以作为速效氮源，对红霉素的生长合成有促进作用，提高红霉素发酵的整体发酵水平。

为实现上述发明目的所采取的技术方案为：

配制0.01～3%硫氰酸盐溶液，灭菌待用。在红霉素发酵至80～100h时，发酵单位为4000～5000u/ml时开始流加硫氰酸盐（硫氰酸铵、硫氰酸钠），补入速率为0.2ml～2ml/h/L，直至放罐。

具体实施方式

对比实施例：

红霉素正常发酵，在30～40h间开始流加补入碳源、氮源类物质，以及合成红霉素的前体物质，发酵至170h放罐，放罐单位为7850u/ml。

实施例1：

首先用分析天平称取硫氰酸钠1g，使用1000mL容量瓶定容，配制0.1%硫氰酸钠，将配制好的硫氰酸钠摇匀倒入补料瓶，灭菌后待用，在红霉素正常发酵至80h，发酵单位为4500u/ml时开始流加硫氰酸钠，流加硫氰酸钠的浓度为0.1%，流加速率为0.3ml/h/L。发酵至170h放罐，放罐单位为9500u/ml，相比对照罐增长了21%。

实施例2：

首先用分析天平称取硫氰酸铵30g，使用1000mL容量瓶定容，配制3.0%硫氰酸铵，将配制好的硫氰酸铵摇匀倒入补料瓶，灭菌后待用，在红霉素正常发酵至80h，发酵单位为4750u/ml时开始流加硫氰酸铵，流加硫氰酸铵的浓度为3.0%，流加速率为0.2ml/h/L。发酵至170h放罐，放罐单位为9720u/ml，相比对照罐增长了23.8%。

实施例3：

首先用分析天平称取硫氰酸钠8g，使用1000mL容量瓶定容，配制0.8%硫氰酸钠，将配制好的硫氰酸钠摇匀倒入补料瓶，灭菌后待用，在红霉素正常发酵至80h，发酵单位为4230u/ml。开始流加硫氰酸钠，流加硫氰酸钠的浓度为0.8%，流加速率为1.0ml/h/L。发酵至170h放罐，放罐单位为9680u/ml，相比对照罐增长了23.3%。