[发明专利]一种获得ＰＣＲ扩增片段的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种实验方法，具体来说，一种获得ＰＣＲ扩增片段的方法。

背景技术

质粒是真核细胞细胞核外或原核生物拟核区外能够进行自主复制的遗传单位，包括真核生物的细胞器（主要指线粒体和叶绿体）中和细菌细胞拟核区以外的环状脱氧核糖核酸(DNA)分子。现在习惯上用来专指细菌(大肠杆菌）、酵母菌和放线菌等生物中细胞核或拟核中的DNA以外的DNA分子。在基因工程中质粒常被用做基因的载体(Vector)。许多细菌除了拟核中的DNA外，还有大量很小的环状DNA分子，这就是质粒(plasmid)（补充：部分质粒为RNA）。质粒上常有抗生素的抗性基因，例如，四环素抗性基因或卡那霉素抗性基因等。有些质粒称为附加体(episome)，这类质粒能够整合进真菌的染色体，也能从整合位置上切离下来成为游离于染色体外的DNA分子。质粒在宿主细胞体内外都可复制，通过个些特性，人们可以把一些目的DNA片断构建在质粒中，通过转化入大肠杆菌中，不断的复制，来得到目的产物。这就是转化的目的。

发明内容

为克服上述技术问题，我们提出了以下技术方案：

一种获得ＰＣＲ扩增片段的方法，步骤如下：首先将对象ＰＣＲ加入模版DNA2ul,以及ddH2O36.5ul，并将混合物摇匀；待其混合均匀后放置86摄氏度的环境下进行变性，时间1-6分钟；再将混合物放置下列环境下：90-95摄氏度，18秒，55摄氏度，半分钟，75摄氏度1分钟；将上述步骤循环3次即得。

本发明中，所得PCR扩增片段需要在21摄氏度条件下进行保存。 

本发明的有益效果是，可以有效避免蛋白氨基酸丢失，且稳定性好，表达量高，具有成本低，操作简单的优点。

具体实施方式

一种获得ＰＣＲ扩增片段的方法，步骤如下：首先将对象ＰＣＲ加入模版DNA2ul,以及ddH2O36.5ul，并将混合物摇匀；待其混合均匀后放置86摄氏度的环境下进行变性，时间3分钟；再将混合物放置下列环境下：92摄氏度，18秒，55摄氏度，半分钟，75摄氏度1分钟；将上述步骤循环3次即得。所得PCR扩增片段需要在21摄氏度条件下进行保存。

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。