[发明专利]同时检测胱抑素C和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的检测装置及检测方法

权利要求书

1.一种同时检测胱抑素C和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的检测装置及检测方法，其特征在于装置由相互独立的胱抑素C(CYS C)和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)检测试纸、双联卡壳、样本稀释液和内置了相应标准曲线和判定方法的免疫层析结果判读记录仪组成。

2.根据权利要求1所述的检测装置，其特征在于CYS C检测试剂试纸由含有胶体金标记的抗人CYS C抗体的胶体金垫、包被有配对CYS C抗体(T线)和抗鼠IgG(C线)的NC膜、样品垫、吸样垫和塑料底板组成。NGAL检测试剂试纸由含有胶体金标记的抗人NGAL抗体的胶体金垫、包被有配对NGAL抗体(T线)和抗鼠IgG(C线)的NC膜、样品垫、吸样垫和塑料底板组成。试纸宽度为3-5mm，长度为7-8cm。样品垫、胶体金垫、NC膜和吸样垫从塑料底板一端依次排列至另一端。

3.根据权利要求1所述的检测装置，其特征在于双联卡壳包含上盖和下盖两个部分，内部可平行放置两条检测试纸。卡壳上盖的下部对应样品垫部分设置了样品孔，用于加入样本，卡壳上盖的中间部分应对试纸NC膜中部设置了视窗口，用于观察NC膜上的C、T线，判定结果。样本稀释液为0.01M pH7.4的磷酸盐缓冲液。

4.根据权利要求1和2所述的检测装置，其特征在于所述NC膜是一种由硝酸纤维素构成的多孔结构的膜，孔径为8-12um。稀释液垫为玻璃纤维膜或无纺布，吸样垫为吸水滤纸。

5.根据权利要求1和2所述的检测装置，其特征在于包被有配对抗体的NC膜制备过程为：以0.01M pH7.4磷酸盐缓冲液(PBS)将配对的CYS C或NGAL抗体配制成合适的浓度，在喷膜仪在NC膜上以1.2-1.5ul／cm的参数进行划线，包被T线，同时在NC膜上部包被1-2mg／ml的抗鼠IgG作为C线。干燥，备用。

6.根据权利要求1和2所述检测装置，其特征在于胶体金垫的制备过程为：取100ml胶体金液放在烧杯内，用0.2M K₂CO3调至pH7.5-8.5，再加入0.7-1.5mg标记用CYS C或NGAL抗体，室温搅拌30min，封闭，12000rpm离心30分钟，弃上清，用工作液复溶至65ml，然后用喷金机分别均匀地喷涂在胶体金垫上，干燥备用。

7.根据权利要求1所述的检测装置，其特征在检测卡装配方法为：在相对湿度小于40％的条件下，取塑料底板，将已包被CYS C或NGAL的NC膜粘贴在底板的中部，在NC膜T线一侧粘贴胶体金垫，在胶体金垫另一侧粘贴样品垫；在NC膜C线一侧粘贴吸样垫；各粘贴组分接口相互叠压1-2mm，粘贴好的大板切成3-5mm宽的试纸条。然后将两种试纸条分别放置于双联卡壳下盖的槽中，然后盖上上盖，压紧，完成装配。

8.根据权利要求1所述的检测装置，其特征在于免疫层析结果判读记录仪是一种光学检测系统，内置了对CYS C和NGAL试纸的标准曲线和判定方法，用于对检测结果的定量判定，对CYS C和NGAL检测范围分别为200-5000ng／mL和100-5000ng／mL，并根据两个试剂的检测结果对肾功能损伤进行综合判定。

9.根据权利要求1所述的检测装置，其特征在于检测方法为：检测时将10ul的被检样本如血清、血浆、尿液或20ul全血加入到1ml的样本稀释液中，混均，然后各取100ul稀释后的样本加入到检测卡的两个样品孔中，在10-15分钟内，用免疫层析结果判读记录仪对检测结果进行判定。