[发明专利]防治棉花黄萎病的菌剂及其制备方法和它们的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种菌剂及其制备方法和应用；更确切地说，涉及一种防治棉花黄萎病的菌剂及其制备方法和它们在防治棉花黄萎病中的应用。

背景技术

棉花黄萎病是由大丽轮枝菌引起的一种真菌性病害，是一种危害性很大的维管束系统病害，由大丽轮枝菌引起的棉花黄萎病是几乎所有棉花生产国棉花生产的主要限制因素。由于高抗黄萎病的棉花品种较少，且对黄萎病致病的机理以及棉花抗黄萎病的遗传方式的了解还比较少，因此，目前对棉花黄萎病的防治还是以生物防治为主，但现有的生物菌剂对棉花黄萎病的防治效果均不够理想，因此，迫切需要开发一种能够有效防治棉花黄萎病的菌剂。

发明内容

本发明的目的在于克服现有生物菌剂存在的防治棉花黄萎病的效果不理想的问题，提供一种能够有效防治棉花黄萎病的菌剂及其制备方法和它们的应用。

为了实现第一个发明目的，本发明提供了一种菌剂，该菌剂包括培养基和菌体，其中，所述菌体包括枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）、蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）、灰绿链霉菌（Streptomycesviridogriseus）和荧光假单胞杆菌（Pseudomonas fluorescens）。

为了实现第二个发明目的，本发明还提供了一种菌剂的制备方法，其中，该方法包括：该方法包括：将枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）、蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）、灰绿链霉菌（Streptomycesviridogriseus）和荧光假单胞杆菌（Pseudomonas fluorescens）接种于培养基中进行培养。

本发明还提供了所述的菌剂在预防棉花黄萎病中的应用。

本发明提供的的菌剂能够有效防治棉花黄萎病，具有广阔的应用前景。

具体实施方式

本发明提供了一种菌剂，该菌剂包括培养基和菌体，其中，所述菌体包括枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）、蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）、灰绿链霉菌（Streptomycesviridogriseus）和荧光假单胞杆菌（Pseudomonas fluorescens）。

所述菌剂中含有的菌体的量可以在很大范围内改变，优选情况下，每克所述菌剂所含的总活菌数可以为1-5×10¹⁰个。

优选地，所述菌剂中，以所述菌剂中的总活菌数为基准，枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）的活菌数可以为总活菌数的10-50％、短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）的活菌数可以为总活菌数的10-50％、蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）的活菌数可以为总活菌数的10-50%、灰绿链霉菌（Streptomycesviridogriseus）的活菌数可以为总活菌数的10-50%、荧光假单胞杆菌（Pseudomonas fluorescens）的活菌数可以为总活菌数的10-50%

更优选地，以所述菌剂中的总活菌数为基准，枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）的活菌数可以为总活菌数的25-35％、短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）的活菌数可以为总活菌数的25-35％、蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）的活菌数可以为总活菌数的10-15％、灰绿链霉菌（Streptomycesviridogriseus）的活菌数可以为总活菌数的10-15％、荧光假单胞杆菌（Pseudomonas fluorescens）的活菌数可以为总活菌数的10-15％。

根据本发明，所述培养基的种类可以在很大范围内改变，可以为各种能够用于培养枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、灰绿链霉菌、荧光假单胞杆菌的培养基，例如，可以为马铃薯蔗糖培养基、LB培养基和CM培养基中的一种或几种，优选为马铃薯蔗糖培养基。上述培养基能够商购得到或者根据“微生物培养基手册”（Microbiology Culture Media Manual）的记载制备得到。例如，马铃薯蔗糖培养基（马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15～20g，水1000mL）的制备方法可以为：将200g去皮马铃薯切碎，煮烂后取得土豆汁，加入20g葡萄糖或者蔗糖，加入琼脂15～20g，加水至1000mL，121℃灭菌即可。