[发明专利]鉴定不同产地的道地药材麦冬的方法,以及用于该方法的试剂盒有效
申请号: | 201310526080.X | 申请日: | 2013-10-30 |
公开(公告)号: | CN103540674A | 公开(公告)日: | 2014-01-29 |
发明(设计)人: | 陈士林;刘霞;林韵涵;马晓冲;张雅琴;宋明;王俊 | 申请(专利权)人: | 中国中医科学院中药研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 北京戈程知识产权代理有限公司 11314 | 代理人: | 程伟;韩文华 |
地址: | 100700 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鉴定 不同 产地 道地 药材 麦冬 方法 以及 用于 试剂盒 | ||
1.一种鉴定浙麦冬和川麦冬的方法,其包括以下步骤:
(1)从不同道地产区的麦冬样品中提取DNA样品;
(2)鉴定如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列第88位碱基。
2.根据权利要求1所述的方法,其中当SEQ ID No.1所示序列的第88位碱基为G,则鉴定为浙麦冬;当SEQ ID No.1所示序列的第88位碱基为A,则鉴定为川麦冬。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其进一步包括以所获的DNA样品为模板,扩增含有SEQ ID No.1所示序列的DNA片段的步骤。
4.根据权利要求1或2所述的方法,其中可以使用选自限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)、DNA测序法、根据DNA列阵的微测序法、动态等位基因特异的杂交、寡聚核苷酸特异的连接、DNA芯片以及TaqMan系统方法、单链构象多态性(SSCP)、等位基因特异的寡聚核苷酸杂交(ASO)的方法检测上述SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列第88位碱基。
5.根据权利要求3所述的方法,其中使用如下引物扩增含有SEQ ID No.1所示序列的DNA片段:
正向序列LA-F20:ATGCTCACAACTTCCCTCTA;
反向序列LA-R260:CGCCTACTCTGACTTTCG。
6.一种分离的核酸,其具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列,其中在所述核酸的第88位碱基具有SNP88A/G。
7.如SEQ ID No.1所示序列的SNP88A/G作为分子标记物在用于鉴别浙麦冬和川麦冬中的用途。
8.根据权利要求7所述的用途,其中当SEQ ID No.1所示序列的第88位碱基为G,则鉴定为浙麦冬;当SEQ ID No.1所示序列的第88位碱基为A,则鉴定为川麦冬。
9.一种用于鉴别浙麦冬和川麦冬的试剂盒,所述试剂盒含有至少一种用于检测SEQ ID No.1所示序列的SNP88A/G的试剂。
10.根据权利要求9所述的试剂盒,其含有如下序列所示的引物:
正向序列LA-F20:ATGCTCACAACTTCCCTCTA;
反向序列LA-R260:CGCCTACTCTGACTTTCG。
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