[发明专利]HPLC同时测定裸花紫珠制剂中三种苯乙醇苷类成分的方法

说明书

技术领域

本发明属于药物检测技术领域，特别涉及同时测定裸花紫珠制剂中三种苯乙醇苷类成分的方法。

背景技术

裸花紫珠制剂如裸花紫珠片、裸花紫珠栓、裸花紫珠分散片等，具有镇痛、消炎、解毒、收敛止血等功效，其药效是多种活性成分共同作用的结果，目前裸花紫珠制剂如裸花紫珠片的检测的方法主要为以分光光度法测定总黄酮含量，以高效液相法测定指标性成分如木犀草素、毛蕊花糖苷、连翘酯苷等。紫珠属化学成分研究表明苯乙醇苷类成分是该属植物的主要成分类群之一。申请人通过研究也发现连翘酯苷B、毛蕊花糖苷与异毛蕊花糖苷是裸花紫珠片的主要成分。同时现代药理研究表明连翘酯苷B、毛蕊花糖苷与异毛蕊花糖苷具有抗血栓、降血脂、抗氧化、抑制肝细胞毒性和调节非特异性免疫反应等多方面的作用。但目前还没有同时测定这三种成分的文献报道。《中成药》2011年3月收载的陈德金等《HPLC法测定裸花紫珠片中毛蕊花糖苷及连翘酯苷的含量》，其样品处理繁琐，且没有检测出主要成分异毛蕊花糖苷等问题。

发明内容

本发明的目的就是针对裸花紫珠制剂的检测现状，为有效地控制裸花紫珠制剂的内在质量，提供一种同时测定裸花紫珠制剂中三种苯乙醇苷类成分的方法，有利于对裸花紫珠制剂产品质量的有效控制及保证其临床疗效。

一种同时测定裸花紫珠制剂中三种苯乙醇苷类成分的方法，包括如下步骤：

（1）对照品溶液的制备：

分别称取连翘酯苷、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷对照品，置于容量瓶中，加25%～75%乙醇或甲醇，超声溶解并定容至刻度，摇匀，制成对照品溶液；

（2）供试品溶液的制备：

裸花紫珠制剂供试品溶液的制备：取裸花紫珠制剂，置锥形瓶中，加25%～75%乙醇或甲醇，称重，超声处理30～90min，放冷，再称定重量，用同种溶剂补重，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液，即得裸花紫珠制剂供试品溶液；

（3）HPLC检测：

分别吸取步骤（1）和（2）所得的裸花紫珠对照品溶液和裸花紫珠制剂供试品溶液，分别注入高效液相色谱仪中进行测定；

其中，色谱条件为：色谱柱为C₁₈反相色谱柱；紫外检测器；柱温为30～35℃；检测波长为320～340nm；流动相A为乙腈，流动相B为0.1～0.5%磷酸溶液，流速为0.8～1.2ml/min；分析时间25分钟；等度洗脱，流动相A:流动相B＝18～20:82～80。

所述步骤（1）供试品溶液的制备优选为下述方法进行：

分别称取连翘酯苷对照品11.70mg、毛蕊花糖苷对照品23.15mg、异毛蕊花糖苷对照品26.75mg，置于容量瓶中，加25%～75%乙醇或甲醇，超声溶解并定容至刻度，摇匀，制成对照品溶液。

所述步骤（2）供试品溶液的制备优选为下述方法进行：

a、裸花紫珠制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、栓剂：取裸花紫珠制剂内容物，研细，称取0.1～3g，置锥形瓶中，加25%～75%乙醇或甲醇25～100ml，称重，超声处理30～90min，放冷，再称定重量，用同种溶剂补重，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液，即得裸花紫珠制剂供试品溶液；

b、裸花紫珠制剂为合剂、口服液：取裸花紫珠制剂混匀，精密量取5～10ml，置25～100ml容量瓶中，加25%～75%乙醇或甲醇20～90ml，超声处理30～90min，放冷，用同种溶剂稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液，即得裸花紫珠制剂供试品溶液。

所述步骤（3）中的色谱柱优选柱长为250mm的C₁₈反相色谱柱。

所述步骤（3）中检测波长优选为327nm。

所述步骤（3）中流动相B优选为0.4%磷酸溶液。

所述步骤（3）中流速优选为1ml/min。

所述步骤（1）和（2）中乙醇或甲醇浓度优选为50%。

所述步骤（3）中流动相A:流动相B的体积比优选为18.2:81.8。

所述步骤（2）中超声处理时间优选为45分钟。

本发明所述裸花紫珠制剂为：片剂、胶囊剂、颗粒剂、栓剂、合剂、口服液。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明方法的操作简便、准确度高、专属性好、精密度较高、重现性良好，有利于保证裸花紫珠制剂的质量稳定和临床疗效。

附图说明

图1为检测波长3D图；

图2为三种标准品的HPLC色谱图；

图3为裸花紫珠片HPLC色谱图；