[发明专利]一种可保持蛋白、多肽类药物活性的缓释聚乳酸类微球及其制备方法

说明书

技术领域

本发明是一种可保持蛋白、多肽类药物活性的缓释聚乳酸类微球及其制备方法主要涉及医药领域。 

背景技术

随着生物技术的高速发展，多肽、蛋白质类药物不断涌现。目前已有35种重要治疗药物上市，生物技术与生物制药企业的发展也日益全球化。生物技术药物研究的重点是应用DNA重组技术开发可应用于临床的多肽、蛋白、酶、激素、疫苗、细胞生长因子及单克隆抗体等。但这些药物在胃肠道内稳定性差，易变性，易被消化酶降解，不易吸收，这些局限性影响了它们口服给药的生物利用度。目前蛋白质类药物大多采用注射方式给药，因此如何减少注射次数/提高药效成为蛋白、多肽类药物注射给药面临的一个主要问题。 

目前多肽、蛋白质类药物常用的剂型是注射用溶液剂或冻干粉针剂，它们在血液中的半衰期一般很短，静脉注射后很快就被清除或降解，因此需要经常给药，给病人带来较多不便。因此，开展多肽、蛋白质类生物大分子药物缓释或控释制剂的研究已成为该类药物制剂研究的热点。 

目前生物大分子药物缓控释制剂研究涉及最多的是微粒递释系统，即采用生物可降解聚合物为囊材包裹多肽、蛋白质药物制成微球制剂，使其在体内达到缓择或控程目的。 

聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）是一种具有良好的生物相容性及生物降解性的高聚物，已被美国FDA批准为药用高分子材料。现已有数个多肽类药物长效注射微球产品批准上市，如曲普瑞林、丙氨瑞林、醋酸戈舍瑞林、奥曲肽此类微球制剂能使药物延长释放达1个月，甚至3个月。因此，以生物可降解聚合物为囊材的微囊化技术是开发研制多肽缓、控释剂型的有效途径，颇具发展前景。 

采用生物降解型材料，尤其是聚乳酸类材料制成药物微球可实现药物的控释或缓释。目前国内、外将中药蛋白药物制成缓释微球的研究报道较多，制备工艺主要有溶剂挥发法、相分离法、喷雾干燥法、沉淀析出法和凝聚法等。但多肽，蛋白类药物缓释微球制备、储存和释放过程中蛋白活性的损失又成为其广泛应用的制约因素，究其原因主要有两方面，一是在制备过程中，一些剧烈的机械力作用（如搅拌、超声）及有机溶剂和乳化剂的接触，导致蛋白聚集，变性，失活；二是在贮存和缓慢释放时，聚合物降解产物使蛋白质周围微环境的pH值下降，这种酸性环境易使蛋白质发生降解、聚合而变性。 

目前国内外的科研工作者已通过改进微球制备方法与优选添加剂等方法来提高蛋白稳 定性，并取得了一定的进展。（田瑞,王连艳,吴颉,张洁,曾烨婧,马光辉.快速膜乳化法制备粒径均一的PLGA微球和微囊[J].过程工程学报,2009,9(4):754-762；Rafi M.D,Singh S.M,Kanchan V,Anish C.K,Panda A.K.Controlled release of bioactive recombinant human growth hormone from PLGA microparticles[J].Journal of Microencapsulation.2010,27(6):552-560；樊莉.无水法制备干扰素-α-2b PLGA缓释微球的研究[D].第二军医大学,2006）。但目前能够成功同时保持多肽，蛋白类药物在微球制备、储存与体内外释放过程中的生物学活性的报道仍然很少，极大限制了临床应用。目前唯一上市的蛋白类缓释注射微球是美国Genentech,Inc公司采用低温喷雾提取法开发的重组人生长激素PLGA微球（Nutropin Depot^TM）。然而使用这种方法需要相应的设备，样品需要量大，成本高,难于推广，并且这种方法只能改善保持蛋白在缓释微球制备过程中活性的保持，还不能实现长期释放过程的蛋白的活性保持，美国Genentech,Inc公司已经于2004年停止该产品的生产和销售。 

静电纺丝技术的基本原理是将聚合物溶液带上高压静电，带电的聚合物液滴在电场力的作用下在毛细管的Taylor锥顶点被加速，当电场力足够大时，聚合物液滴克服表面张力形成喷射细流。细流在喷射过程中溶剂蒸发，最终落在接收装置上，形成类似非织造布的纤维毡。 

目前静电纺丝技术已广泛应用于复合材料、结构增强体、电化学传感材料、骨架和组织工程材料的制造。在生物医学领域，主要应用于组织工程的细胞生长支架的建立，并复合各种蛋白类生长因子促进细胞增殖分化。