[发明专利]对转染后的RNA进行转膜的方法无效
申请号: | 201310531088.5 | 申请日: | 2013-11-01 |
公开(公告)号: | CN103602733A | 公开(公告)日: | 2014-02-26 |
发明(设计)人: | 刘军 | 申请(专利权)人: | 刘军 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 116000 辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 转染 rna 进行 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种生化实验方法,具体来说,对转染后的RNA进行转膜的方法。
背景技术
硝酸纤维素膜(nitrocellulose filter membrane,简称NC膜),在胶体金试纸中用做C/T线的承载体,同时也是免疫反应的发生处。NC膜是生物学试验中最重要的耗材之一。用探针对细胞或组织切片中的核酸杂交并进行检测的方法称之为核酸原位杂交。某特点是靶分子固定在细胞中,细胞固定在载玻片上,以固定的细胞代替纯化的核酸,然后将载玻片浸入溶有探针的溶液里,探针进入组织细胞与靶分子杂交,而靶分子仍固定在细胞内。例如。可用特异性的细菌、病毒的核酸做为探针对组织、细胞进行原位杂交,以确定有无该病原体的感染等。原位杂交不需从组织中提取核酸,对于组织中含量极低的靶序列有极高的敏感性,在临床应用上有独特的意义。
发明内容
为克服上述技术问题,我们提出了以下技术方案:
对转染后的RNA进行转膜的方法,先将滤纸和NC膜准备好,其中滤纸要求尺寸为7-8厘米,NC膜在使用前需要在转膜缓冲液中浸润至少10分钟;浸润时候需要将膜的一面漂浮在缓冲液中;然后用夹子打开,使其中黑的一面能够与水面保持水品;在其上垫一张海绵垫,海绵垫上放置滤纸;刮掉浓缩胶,玻璃滤纸上的胶盖;将滤纸与分离胶对其;将夹子放入转移槽中,对应正负极。
本发明中,海绵垫上的滤纸至少三层。
本发明中,对应正负极之前可以在室温下静置3-5分钟。
本发明的有益效果是,可以有效鉴定PCR,同时效果明显,表达清楚、稳定,为下一步能够成功建立模型奠定坚实基础。
具体实施方式
对转染后的RNA进行转膜的方法,先将滤纸和NC膜准备好,其中滤纸要求尺寸为7厘米,NC膜在使用前需要在转膜缓冲液中浸润10分钟;浸润时候需要将膜的一面漂浮在缓冲液中;然后用夹子打开,使其中黑的一面能够与水面保持水品;在其上垫一张海绵垫,海绵垫上放置滤纸;刮掉浓缩胶,玻璃滤纸上的胶盖;将滤纸与分离胶对其;将夹子放入转移槽中,对应正负极。海绵垫上的滤纸四层;对应正负极之前可以在室温下静置4.5分钟。
以上所述,仅为本发明较佳的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的保护范围之内。
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