[发明专利]一种产氢细菌与含油微藻梯级耦合产能的方法

权利要求书

1.一种产氢细菌与含油微藻梯级耦合产能的方法，其特征在于它包括以下步骤：

一、取产氢细菌进行培养；

二、将步骤一产氢细菌产生的有机酸发酵液进行离心，取上清液调节pH至6～9，然后进行高压蒸汽灭菌；

三、向步骤二灭菌后的上清液中接种含油微藻，进行培养；

四、采收步骤三培养得到的含油微藻，然后提取含油微藻中的油脂。

2.根据权利要求1所述的一种产氢细菌与含油微藻梯级耦合产能的方法，其特征在于步骤一中所述的产氢细菌为哈工大产乙醇杆菌、巴氏梭菌、大肠杆菌、丁酸梭菌、丙酮丁醇梭菌、产气肠杆菌中的一种或几种按任意比混合。

3.根据权利要求1所述的一种产氢细菌与含油微藻梯级耦合产能的方法，其特征在于步骤一中所述的产氢细菌培养条件为温度35℃～37℃，避光，充入氮气隔绝空气培养，培养时间为20～40小时。

4.根据权利要求1所述的一种产氢细菌与含油微藻梯级耦合产能的方法，其特征在于步骤二中所述的离心条件如下：转速为8000～12000rpm，离心时间5～20分钟，离心温度4℃～25℃。

5.根据权利要求1所述的一种产氢细菌与含油微藻梯级耦合产能的方法，其特征在于步骤二中所述的高压蒸汽灭菌条件为压力102.9kPa，温度为121℃～126℃，时间15～30分钟。

6.根据权利要求1所述的一种产氢细菌与含油微藻梯级耦合产能的方法，其特征在于步骤三中所述的含油微藻为小球藻、栅藻、硅藻、隐甲藻、扁藻、杜氏藻、螺旋藻、金藻中的一种或几种按任意比混合。

7.根据权利要求1所述的一种产氢细菌与含油微藻梯级耦合产能的方法，其特征在于步骤三中所述的接种液为稳定期种子液，接种量按发酵液总体积的5%～10%来接种。

8.根据权利要求1所述的一种产氢细菌与含油微藻梯级耦合产能的方法，其特征在于步骤三中所述的含油微藻培养条件为温度15℃～40℃，光照培养，光照强度为0～12000lux，培养时间120～192小时。

9.根据权利要求1所述的一种产氢细菌与含油微藻梯级耦合产能的方法，其特征在于步骤四中所述的含油微藻采收方法为离心法或过滤法。

10.根据权利要求1所述的一种产氢细菌与含油微藻梯级耦合产能的方法，其特征在于步骤四中所述的含油微藻油脂提取方法为氯仿-甲醇法、索氏抽提法、正己烷-异丙醇法、正己烷-乙醇法或乙醚-石油醚法。