[发明专利]脑膜炎奈瑟氏菌Z群的特异性检测用引物探针组合和试剂盒

权利要求书

1.一种用于特异性检测样品中脑膜炎奈瑟氏菌Z群的引物组合，这套序列组合特征在于包括下列引物：

P1：5`- TCGCTATGGTTACGGCATGTAG-3`, 

P2：5`- CAGATTGTTGCCCTAAAGAGACAA-3`。

2.一种用于特异性检测样品中脑膜炎奈瑟氏菌Z群的引物和寡核苷酸探针组合，其中引物为权利要求1所述的引物，寡核苷酸探针为：

Probe1：5`-X<sub>1</sub>- CCTCCGGCCCTAGTGCGAAAAA-Y<sub>1</sub> -3`；

X₁为荧光报告基团，Y₁为荧光淬灭基团。

3.如权利要求2所述，这套序列组合特征还在于，其中Probe1荧光报告基团X₁为Fam，荧光淬灭基团Y₁为Eclipse。

4.如权利要求2所述，这套序列组合特征还在于，可用于单重实时荧光聚合酶链反应检测，即一个反应体系可检测出脑膜炎奈瑟氏菌Z群。

5.一种用于特异性检测样品中脑膜炎奈瑟氏菌Z群核酸的试剂盒，其中包括PCR反应液、酶混合液、阴性质控品和阳性质控品，其特征在于PCR反应液中用于核酸扩增反应的引物序列如下：

P1：5`- TCGCTATGGTTACGGCATGTAG-3`, 

P2：5`- CAGATTGTTGCCCTAAAGAGACAA-3`。

6.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于PCR反应液中用于荧光信号监测的寡核苷酸探针的序列如下： 

Probe1：5`-X<sub>1</sub>- CCTCCGGCCCTAGTGCGAAAAA-Y<sub>1</sub> -3`；

X₁为荧光报告基团，Y₁为荧光淬灭基团。

7.如权利要求5所述的的试剂盒，其特征还在于PCR反应液中用于荧光信号监测的寡核苷酸探针：Probe1荧光报告基团X₁为Fam，荧光淬灭基团Y₁为Eclipse。

8.如权利要求5所述的的试剂盒，其特征还在于PCR反应体系为20μl，包括2×PCR缓冲液10 μl、10mmol/L dNTP 1.0μl、25μmol/L引物各0.5 μl、10μmol/L 探针0.2 μl、热启动Taq酶混合液0.4μl、样品DNA 2μl，加灭菌水至终体系20 μl。

9.如权利要求5所述的的试剂盒，其特征还在于PCR反应循环参数为： 

94℃，2min; 进入循环阶段：94℃变性10s，56℃退火50s，72℃延伸15s，共反应40个循环。