[发明专利]检测Y染色体微缺失的引物和试剂盒及其使用方法

权利要求书

1.一种用于检测Y染色体微缺失的引物，其特征在于，所述引物包括8对引物，可同时扩增Y染色体上6个基因位点和两个内参基因；

所述Y染色体上6个基因位点为：SY84、SY86、SY127、SY134、SY254和SY255位点；

所述两个内参基因为：SRY和TP53基因；

特异性扩增SY84位点的引物序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示，

SEQ ID NO:15’-AGAGGAGTCCTGATGCAGGT-3’

SEQ ID NO:25’-GCCCATTACCTGGAGCCTTC-3’

特异性扩增SY86位点的引物序列如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示，

SEQ ID NO:35’-GTGAACCACAGACATGCTTC-3’

SEQ ID NO:45’-ACACACAAGGCGAACCCCT-3’

特异性扩增SY127位点的引物序列如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示，

SEQ ID NO:55’-GGCTCTCACACGAATAGAAA-3’

SEQ ID NO:65’-CTGCTGGCACTAATATGGGA-3’

特异性扩增SY134位点的引物序列如SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示，

SEQ ID NO:75’-GTCTCGCTCACACTAAAACG-3’

SEQ ID NO:85’-ACCAACGCCAATACATTCAA-3’

特异性扩增SY254位点的引物序列如SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10所示，

SEQ ID NO:95’-GGGTCTATCCAGAGAGCAAA-3’

SEQ ID NO:105’-GAACCTGATCTAGCAATGCAGC-3’

特异性扩增SY255位点的引物序列如SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12所示，

SEQ ID NO:115’-GTTACGAGATTGCGCGTGAT-3’

SEQ ID NO:125’-CTCGCTATGTCGAGCCAC-3’

特异性扩增SRY基因的引物序列如SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14所示，

SEQ ID NO:135’-TCGCACCTTCCTTTGTTTTG-3’

SEQ ID NO:145’-CGTTGTAGGGCGTGAAGT-3’

特异性扩增TP53基因的引物序列如SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16所示，

SEQ ID NO:155’-GGACTCGATTCTCTAACTGC-3’

SEQ ID NO:165’-GCTTCTGTTCCTCGTTGCTT-3’。

2.一种包括有权利要求1所述的引物的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括：1）用于扩增Y染色体上SY84、SY86、SY127、SY134、SY254、SY255位点以及内参SRY和TP53基因的引物，引物序列如SEQ ID NO:1～SEQ IDNO:16所示；2)PCR MIX反应液、去离子水、质控对照品；3）分隔并集中包装这些试剂的瓶或管以及包装盒。

3.按照权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述引物的浓度均为10pmol/μl。

4.按照权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述PCR MIX反应液包括Taq DNA聚合酶、dNTPs和MgCl2；其中，所述Taq DNA聚合酶的浓度为50U/ml，所述dNTPs包括dATP、dGTP、dCTP、dTTP，它们的浓度均为400μM，所述MgCl2的浓度为3mM。

5.按照权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述质控对照品为正常男性DNA。