[发明专利]一种小鼠组织mRNA的提取方法在审
申请号: | 201310540660.4 | 申请日: | 2013-11-05 |
公开(公告)号: | CN103614368A | 公开(公告)日: | 2014-03-05 |
发明(设计)人: | 辛竹 | 申请(专利权)人: | 辛竹 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 116000 辽宁省大*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 小鼠 组织 mrna 提取 方法 | ||
技术领域
本发明涉及生化实验领域,具体涉及一种小鼠组织mRNA的提取方法。
背景技术
mRNA,即信使核糖核酸,携带遗传信息,在蛋白质合成时充当模板的RNA。从脱氧核糖核酸(DNA)转录合成的带有遗传信息的一类单链核糖核酸(RNA)。它在核糖体上作为蛋白质合成的模板,决定肽链的氨基酸排列顺序。mRNA存在于原核生物和真核生物的细胞质及真核细胞的某些细胞器(如线粒体和叶绿体)中。mRNA的复制,转录和翻译:由一个DNA分子,边解旋,边转录。利用细胞核内部的游离核糖核苷酸和成其需要的碱基,规则遵循碱基互补配对原则。注:因为mRNA没有T(胸腺嘧啶),所以模版中出现A(腺嘌呤)时,由U(尿嘧啶)代替。以上过程叫做转录,在细胞核中完成。接着,mRNA穿过核孔。和细胞质中的核糖体结合。选择tRNA运输氨基酸,和对应的三个碱基排列好(如何排列请查询:密码子)。再与其它的氨基酸通过肽键连接在一起,形成肽链。以上过程叫做翻译,在细胞质中完成。虽然人们已经破译了决定生命基础的蛋白质的氨基酸合成密码,也知道了是DNA携带着这种密码,但是,根据细胞学所掌握的事实:所有DNA都呆在细胞核内,而蛋白质却存在于细胞质中,像DNA这样的大分子是无法随意进入细胞质的。然而密码总是会被带入细胞质的,这一来,人们不禁要问,是谁把锁在细胞核内的DNA手里的密码带入了细胞质的呢?科学家们从DNA那里拷贝了一份密码文件,并带入了细胞质中。经过试验和观察,发现这个信使就是RNA——核糖核酸。
发明内容
本发明要解决的技术问题在于,针对现有技术缺陷,提供一种技术方案:
一种小鼠组织mRNA的提取方法,步骤如下:首先将小鼠进行初步处理:即引颈处死法处死小鼠,然后解剖出其内脏器官;加入组织研磨成粉末状,摇匀后室温静置10分钟;加入重量体积为百分之十的氯化钙溶液,然后盖紧盖子;随后摇晃,37摄氏度孵育5分钟;加入体积比为百分之五十的异丙醇,然后高速离心;弃上清;保留RNA沉淀;加入无水乙醇;静置半小时后再次高速离心,时间为2分钟;用琼脂糖凝胶进行电泳检测即可。
本发明中,所述琼脂糖凝胶质量百分比为百分之十。
本发明中,弃上清之前需要进行干燥,在温度为80度的烤箱中烘烤一分钟。
本发明的有益效果是:操作简单,成本较低,可以准确进行筛选,重复操作性强,筛选精确。
具体实施方式
一种小鼠组织mRNA的提取方法,其特征在于,步骤如下:首先将小鼠进行初步处理:即引颈处死法处死小鼠,然后解剖出其内脏器官;加入组织研磨成粉末状,摇匀后室温静置10分钟;加入重量体积为百分之十的氯化钙溶液,然后盖紧盖子;随后摇晃,37摄氏度孵育5分钟;加入体积比为百分之五十的异丙醇,然后高速离心;弃上清;保留RNA沉淀;加入无水乙醇;静置半小时后再次高速离心,时间为2分钟;用琼脂糖凝胶进行电泳检测即可;所述琼脂糖凝胶质量百分比为百分之十;弃上清之前需要进行干燥,在温度为80度的烤箱中烘烤一分钟。
以上所述,仅为本发明较佳的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的保护范围之内。
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